Revista Colombiana de Entomología

**Detection of Beauvericin in the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana by using polyclonal antibodies**

El hongo entomopatògeno Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin es una buena herramienta para el control biologico de insectos que atacan cultivos de importancia economica. Este hongo produce una toxina ciclo hexadepsipeptida que muestra actividad biologica como insecticida. El objetivo de este estudio fue producir anticuerpos policlonales que pueden ser utilizados para cuantificacion inmunologica de la produccion de beauvericina en siete (7) aislamientos de B. bassiana (Bb) provenientes de la micoteca de Cenicafe-Colombia. Cultivos liquidos Sabouraud se inocularon con 3,0 X 10(5) conidios/ml de cada aislamiento de B. bassiana y los extractos se filtraron y se evaluaron a los 7, 9 y 11 dias de crecimiento. Los anticuerpos se obtuvieron a traves de dos aplicaciones intramusculares a conejos de la raza Mueva Zelanda. Las inyecciones contenian 2,5 mg del inmunogeno emulsificado en adjuvante completo de Freund's para la primera y adjuvante incompleto de Freund's para la segunda aplicacion, respectivamente. Las pruebas serologicas utilizadas en este experimento fueron ELISA y Dot - blot. Los resultados mostraron diferencias en la produccion de la toxina entre los siete aislamientos del hongo B. bassiana. Se presentaron picos de produccion de la toxina entre los 9 y 11 dias de cultivo. Los niveles detectados de beauvericina fluctuaron entre 1,16 ug / ul para el aislamiento B. bassiana 9610 y 1.57 ug/ul para el aislamiento B. bassiana 9205. Con esta metodologia se podran seleccionar aislamientos mas eficientes para producir la toxina, los cuales pueden ser incorporados en los programas de manejo integrado de plagas.

The entomopathogenic fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin is a good tool for biological control of insects that attack economically important crops. This fungus produces a ciclohcxadepsipeptide toxin that exhibits biological activity as an insecticide. The objective of this research was to produce polyclonal antibodies (Pabs) that could be used for the immunologicai quantification method in order to quantify of the produccion of beauvericin in seven (7) strains of B. bassiana (Bb) from the collection of Cenicafe-Colombia. Liquid cultures of Sabouraud s medium were inoculated with 3,0 x 10* conidia/ml of each isolate and these extracts were filtered and evaluated at 7, 9 and 11 days of growth. Pabs were obtained through two intramuscular injections in New Zealand white rabbits. The injections contained 2,5 mg of the emulsified immunogen with Freund's complete adjuvant for the first injection and with Freund's incomplete adjuvant for the second. The serological tests used in this experiment were ELISA and Dot-blot. The results showed differences in toxin produccion among seven isolates of the fungus B. bassiana. All isolations showed a peak of produccion between 9 and 11 days of culture. The levels of the beauvericin detected fluctuated between 1,16 ug/ul for isolate B. bassiana 9610 and 1,57 ug/ul for isolate B. bassiana 9205. This methodology will permit selection of the strains most efficient in toxin produccion, which could be incorporated into integrated pest management programs.

Pimeliaphilus triatomae (Acari: Pteregosomidae) used as biological control of Meccus pallidipennis (Hemiptera: Reduviidae) in laboratory conditions

Pimeliaphilus triatomae es un ectoparásito considerado entomopatógeno de Triatominos; sin embargo, hasta el momento no existe evidencia de la mortalidad y de la acción que éste ejerce sobre sus víctimas. Por este motivo se comparó el efecto del parasitismo sobre los cinco ínstares ninfales y adultos, así como de los huevos ovipositados por éstos. Se observó el ciclo de vida del ácaro durante su actividad parasitaria y los resultados obtenidos indican una disminución de la oviposición y un prolongación en el ciclo de vida de los insectos infestados con un X = de 456 dias. También se obtuvo una mortalidad alta en los ínstares ninfales, en los cuales se observó la rotura de la epicuticula y la muerte por vaciado estomacal, después de mantener una carga parasitaria alta. Al comparar los individuos infestados con cada grupo control se hallaron en las variables de estudio, mortalidad, oviposición y viabilidad de los huevos, diferencias significativas para un a = 0.05.

Pimeliaphilus triatomae is a parasite considered entomopathogenic to triatomines; up to now, however, there is no evidence for the mortality or the action it has on its victims. For this reason the effect of parasitism was compared on the fve nymphal instars and adults, as well as the eggs laid by them. The lifecycle of the mites was observed during their parasitic activity and the results obtained show a decrease in the oviposition and a prolongation in the life cycle of the inksted insects with a X= of 456 days. A high mortality was obtained in all the nymphal instars in which a rupture in the epicuticle and death by stomach evaluation was observed, aftermaintaining high parasitic load. When comparing infested individuals with each control group there were significant diferences (a= 0.05) , in the motyality. oviposition and viability of the eggs

**A new species of myrmecophilous soft scale insect from Colombia in the genus Akermes Cockerell(Hemiptera: Coccoidea: Coccidae)**

A new species of myrmecophilous soft scale in the genus Akermes Cockerell, collected in Colombia, is described and illustrated. Information on distribution, host plants and morphological variation is given. This is the first record of the genus Akermes in Colombia.

Una nueva especie de escama blanda mirmecofila del genero Akermes Cockerell, colectada en Colombia, es descrita e ilustrada. Se incluye informacion sobre su distribucion, hospederos y variacion morfologica. Este es el primer registro del genero Akermes en Colombia.

Observations on the biology and behavior of the mite Macrodinychus sellnicki (Mesostigmata: Uropodidae), ectoparasite of the crazy ant Paratrechina fulva (Hymenoptera: Formicidae)

La "hormiga loca" Paratrechina fulva (Mayr) ha encontrado en el cultivo de cana de azucar las condiciones adecuadas para establecerse y proliferar, lo que ha ocasionado serios problemas al sector. En 1996, se detecto en el Ingenio Risaralda la presencia de un acaro atacando las pupas de la hormiga; diversas investigaciones condujeron a elucidar su biologia, comportamiento y otras relaciones existentes entre el acaro y la hormiga, en orden a determinar la posibilidad de usar el acaro como agente de control de poblaciones de la hormiga loca. El acaro identificado como Macrodinychus sellnicki (Hirschmann) es mirmecofilo y se desarrolla como ectoparasitoide de la pupa succionando los liquidos internos de ella, la cual muere al emerger el adulto. En condiciones de campo, se determino que el acaro puede presentar rangos de parasitismo entre 0 y 93%. Antes de llegar al estado adulto M sellnicki pasa por tres estados de desarrollo: larva, protoninfa y deutoninfa. La duracion de su ciclo de vida fue de 30 dias en promedio contabilizado desde larvas activas hasta la emergencia del adulto. Despues de copuladas las hembras formaron huevos a los siete dias y larvas a los 37, sugiriendo oviviparidad. No se logro observar el proceso de salida de las larvas, las cuales son moviles lo que les permite ubicar a su hospedero. Los dos estados ninfales sufren cambios regresivos en los organos locomotores. M sellnicki tiene una alta capacidad para afectar las poblaciones de P. fulva, pero su reproduccion masiva en laboratorio no fue posible. Su uso, por lo tanto, consistiria en liberaciones inoculativas de material de campo altamente parasitado, en sectores donde se presenten explosiones de hormiga loca y el acaro este ausente.

The crazy ant Paratrechina fulva (Mayr) has conditions found in sugarcane adequate for establishing and proliferating, causing serious problems to growers. In 1996, the presence of a mite attacking crazy ant pupae was detected in Risaralda sugar mill; several investigations were conducted to elucidate its biology, behaviour other relationships between the mite and the ant, in order to determine the possibility of using the mite as a control agent of ant populations. The mite, identify as Macrodinychus sellnicki (Hirschmann), is a myrmecophile and develops as an ectoparasitoid sucking internal fluids of the pupa, which in turn dies when the adult mite emerges. Percent parasitism by mites in the field may vary from 0 to 93%. Before becoming an adult M sellnicki passes through three development stages: larva, protonymph and deutonymph. Mean duration of the life cycle was 30 days from active larva to emerged adult. After copulation, females formed eggs 7 days later and larvae 37 days later, suggesting ovoviviparity. Birth of larvae was not observed; these are active and seek their host. Nymphal stages have regressive development of their locomotion appendages. M sellnicki has a high capacity to affect P. fulva populations but its mass reproduction in laboratory was not possible. Its potential use therefore would be inoculative, consisting of liberations of highly parasitized individuals obtained from the field into areas where there are crazy ant outbreaks but the mite is absent.

**Observation of the pathogenicity of Metarhizium anisopliae in Nasutitermes sp. Soldiers (Isoptera: Termitidae)**

Soldados de la termita Nasutitermes sp., plaga del arbol del nogal cafetero Cordia alliodora (Ruiz & Pav.) Oken de la familia Boraginaceae, de gran importancia economica y medica, se inocularon in vitro con el hongo entomopatogeno Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sor. a una concentracidn de 1x 107 conidios/ml del hongo impregnadas en lonas y papel de filtro. Observaciones del desarrollo de la infeccion del hongo fueron realizadas con el microscopio de luz. El desarrollo del hongo se observo en placas tenidas con azul de lactofenol, utilizando la tecnica de aclaracion en soluciones de KOH al 5, 10, 15 y 20%. Las termitas infectadas murieron de 1 a 3 dias post-inoculacion, el hongo penetrando la cuticula a las 24 h, colonizando el tejido graso a las 72 h e invadiendo los organos internos (intestino) despues de 72 h de la infeccion. A las 120 h masas compactas de conidioforos empezaron a emerger de la cuticula presentando coloracion blanca, ubicandose en las regiones intersegmentales de la superficie ventral (patas, torax) y partes bucales de los insectos. El micelio se torno verde a las 144 h de inoculacion, y a las 192 h se hizo mas oscuro y polvoso, invadiendo totalmente el cuerpo de la termita.

Soldiers of Nasutitermes sp., pests of Cordia alliodora (Ruiz & Pav.) Oken, family Boraginaceae, a tree of great economic and medicinal importance were inoculated in vitro with the fungus Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sor. impregnated on canvases or filter paper at a concentration of lxl07 conidias/ml. Observations on the development of the fungal infection were made with a light microscope. The development of the fungus was observed on mounted slides with lactofenol blue, using a clarifying technique with KOH solutions at 5, 10, 15 and 20%. Infected termites died I to 3 days post-inoculation, the fungus penetrating the cuticle at 24 hours, colonizing the fat tissue at 72 hours and invading the internal organs (gut) after 72 hours of infection. At 120 hours a white compact mass of conidiophores began to emerge from the cuticle at the intersegmental regions of the ventral surface (legs, thorax) and mouthparts of the insects. After 144 hours of inoculation the mycelia changed to green, and at 192 hours the mycelia turned dark and powdery when the termite body was totally invaded.

**Preliminary study of the genetic structure of Triatoma venosa (Hemiptera: Reduviidae) using RAPD molecular markers**

Triatoma venosa es uno de los principales vectores secundarios de la enfermedad de Chagas en Colombia. Para estudiar su estructura genetica se colectaron 30 individuos adultos de T. venosa en los municipios de Somondoco (veredas de Cabrera y Barreras), Guateque (veredas de Llano Grande, Tincachoque, y Cantoras) y Sutatenza (veredas de Sisquique, Ovejeras, el Gaque y Piedra Larga), departamento de Boyaca, provenientes de dos habitats diferentes (peridomestico y domestico). El ADN genomico de cada individuo se amplified por RAPD utilizando 4 iniciadores, los productos se visualizaron mediante electroforesis en geles de poliacrilamida al 6% tenidos con plata. Al realizar un analisis mediante el programa SYNTAX 2000 y RAPDPLOT se obtuvo un dendrograma donde no se define un cluster para cada poblacion de insectos evaluada. Al analizar la matriz de datos con RAPDFST se obtuvo un Fst de Wright de 0,047 y de Weir & Cockerham de 0,056. La tasa efectiva de migracion en este analisis fue de 5,0 con la metodologia de Wright, y de 4,2 con la de Weir & Cockerham. Estos resultados preliminares indican una gran movilidad de los insectos entre los dos habitats y un elevado flujo genetico que no permite el establecimiento de diferenciacion genetica entre las poblaciones domesticas y peridomesticas analizadas.

Triatoma venosa is one of the main secondary vectors of Chagas Disease in Colombia. To study its genetic structure, 30 adult individuals of T. venosa were collected in the municipalities of Somondoco (villages of Cabrera and Barreras), Guateque (villages of Llano Grande, Tincachoque, and Cantoras) and Sutatenza (villages of Sisquique, Ovejeras, el Gaque and Piedra Larga) department of Boyaca, from two different habitats (peridomestic and domestic). Genomic DNA of each individual was amplified by RAPD using 4 primers; the products were visualized after polyacrilamide gel electrophoresis followed by 6% silver staining. The dendrogram obtained after analysis with SYNTAX 2000 and RAPDPLOT software did not define a cluster for each insect population evaluated. When the binary matrix was analyzed with RAPDFST software, the Wright's Fst was 0,047 and Weir & Cockerham's Fst was 0,056. The effective migration rate in this analysis was 5,0 under Wright's methodology and 4,2 under Weir & Cockerham's methodology. These preliminary results indicate a high mobility of the insects between the two habitats and a high genetic flow, which do not allow the establishment of genetic differentiation between the domestic and peridomestic populations analyzed.

The effect of the association of watermelon ( Citrullus lanatus) with corn ( Zea mays) on the population and damage caused by three insects pests and the yield of those crops in Cienaga Grande de Lorica, Cordoba

Con el propòsito de conocer el efecto de la asociacion patilla [Citrillus lanatus (Thumb) Matsum & Nakai] con maiz ( Zea mays L.), sobre diabrotica balteata Lec. y Aphis gossypii Glover en patilla; sobre Spodoptera frugiperda Smith y D. balteata en maiz, y el rendimiento en Cienaga Grande de Lorica (Cordoba - Colombia) durante el primer semestre de 2000, se evaluaron tres asocios de patilla (4.800 plantas por hectarea) con maiz (10.000, 20.000 y 30.000 plantas por hectarea) y los monocultivos respectivos. El diseño experimental utilizado fue de bloques completos al azar. Se cuantifico la poblacion y el daño de los insectos, los rendimientos, calidad de la patilla, la rentabilidad y el uso equivalente de la tierra (uet). Los resultados mostraron una disminucion de la poblacion y el daño de D. balteata y A. gossypii en patilla asociada con respecto al monocultivo, con diferencias estadisticas. En maiz, la incidencia de S. frugiperda fue menor a 10.000 plantas por hectarea y D. balteata no registro diferencias estadisticas entre tratamientos. El mayor rendimiento y la mejor calidad de patilla se obtuvieron en asocio con maiz a 10.000 plantas por hectarea: 21.941 kg/ha; y el menor con maiz a 30.000 plantas por hectarea: 6.800 kg/ha; en el monocultivo: 20.460 kg/ha. El rendimiento del maiz vario entre 1.280 y 2.813 kg/ha, proporcional a la densidad de plantas. Economicamente el mejor tratamiento fue patilla con maiz a la menor densidad, con el mayor indice de rentabilidad 3,1 y un uet de 1,55; favorecido por una menor poblacion e incidencia de los insectos plaga estudiados, con una preferencia de los monocultivos sobre sistemas asociados.

In order to understand the effect of the association of watermelon [Citrillus lanatus (Thumb) Matsum 8e Nakai] with corn ( Zea mays L.), on diabrotica balteata Lec. and Aphis gossypii Glover in watermelon, on Spodoptera frugiperda Smith and D. balteata in corn, and yields in the Cienaga Grande de Lorica (Cordoba - Colombia), three associations were evaluated with watermelon (4.800 plants per hectare) with corn (10.000, 20.000 and 30.000 plants per hectare) and their respective monocultures, during the first semester of 2000. The experimental design used was a complete randomized block. Populations and the damage of the insects, yields, quality of the watermelon, profitability and the land equivalent ratio (ler) were quantified. Results showed statistically significance reduction in the population and damage of D. balteata and A. gossypii in associated watermelon with respect to the monoculture. In corn the incidence of S. frugiperda was less in 10.000 plants per hectare and statistical differences between treatments were not detected for D. balteata. The best yield and quality of watermelon were obtained in association with 10.000 corn plants per hectare: 21.941 kg/ha; and the least with 30.000 corn plants per hectare: 6.800 kg/ha; in the monoculture yield was 20.460 kg/ha. Corn yield varied between 1.280 and 2.813 kg/ha, proportional to the density of plants. Economically, the best treatment was watermelon with corn at the lowest density, with the highest index of 3,1 and a ler of 1,55; this was favored by a smaller population and incidence of the insects pests studied with a preference for monoculture over associated systems.

Corthylus n. sp. (Coleoptera: Scolytidae ), pest of alder in rio Blanco basin of Colombia

En plantaciones de aliso, Alnus acuminata HBK, de la cuenca de rio Blanco de Manizales, Caldas, recientemente se ha presentado el ataque de un insecto barrenador de troncos y ramas. El insecto realiza orificios y galerias especialmente en el tronco. A este daño estan asociados hongos ambrosiales que causan pudricion de la madera y la muerte del arbol. Este trabajo describe los estados biologicos, el daño y los hongos asociados al barrenador, examinando especialmente los fustes de los arboles que presentaron ramas secas y poco follaje. El aislamiento de los hongos se realizo a partir de muestras obtenidas del interior de las galerias y del avance de la lesion en el arbol, incluyendo pruebas de patogenicidad en invernadero. El insecto fue identificado por el Dr. Stephen b. Wood como una nueva especie de Corthylus (Coleoptera: Scolytidae ). Los hongos asociados al interior de las galerias se identificaron como: Fusarium solani, Fusarium sp., Verticillium sp. y una levadura que se asemeja a Pichia sp. En la lesion causada por el insecto se encontraron F. solani y Ceratocystis sp. Los resultados indicaron que Corthylus sp. esta asociado en simbiosis con varios hongos ambrosiales y una levadura. Los hongos y la levadura hacen asimilable la madera al insecto y este a su vez permite la invasion de estos organismos, causando finaimente la muerte del arbol. Adicionalmente, el insecto contribuye en la dispersion de los hongos en las plantaciones de aliso. Las pruebas de patogenicidad de los hongos Ceratocystis sp., F solani y Fusarium sp., hechas en arboles de cinco meses y de cuatro anos de edad fueron positivas, mostrando establecimiento y avance sobre la herida del tallo inoculado, obteniendo el mismo manchado observado en el campo.

In alder, Alnus acuminata HBK, plantations of the no Blanco basin, near Manizales, Caldas, the attack of an insect that bores into the trunk and branches of these trees was recently detected. The insect makes holes and galleries especially in the trunk. This damage is associated with ambrosia fungi that cause wood rot and death of the tree. This work describes the biological stages, the damage, and the fungi associated with the borer especially after examination of trees with dry branches and poor follage. Isolation of the fungus was made with samples obtained from the interior of the galleries and from lesions on the tree, including pathogenicity tests in the greenhouse. The insect was identify by Dr. Stephen L. Wood identify as a new species of Corthylus (Coleoptera: Scolytidae ). The fungi associated with the interior of the galleries were identifico as Fusarium solani, Fusarium sp., Verticillium sp. and a yeast similar to Pichia sp. Fusarium solani and Ceratocystis sp. were found in the lesion caused by the insect. Results showed that Corthylus n. sp., has a symbiotic association with several ambrosia fungi and one yeast. These fungi and yeast make the wood available to the insect, and this allows invasion of these organisms, finally causing the death of the tree. Additionally, the insect contributes to the dispersal of the fungi in the alder plantations. The pathogenicity tests with Ceratocystis sp., F. solani, and Fusarium sp., using trees of five months and four years old, were positive, showing establishment and progression of the lesion in the inoculated stem, reproducing the same symptoms observed in the field.

**Effect of entomopathogenic nematodes on populations of the coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Coleoptera: Scolytidae), in berries on the soil**

Se estudio el efecto de dos entomonematodos nativos, Heterorhabditis sp. (Rhabditida: HeteroRhabditidae) y Steinernema sp. (Rhabditida: Steinernematidae) en dosificaciones de 125.000, 250.000 y 500.000 Juveniles Infectivos (JI) por plato del arbol sobre poblaciones de la broca del cafe, Hypothenemus hampei. Durante la primera cosecha de cafe del año 2001, no se encontraron diferencias estadisticas entre tratamientos en cuanto al nivel de infestacion por broca en el arbol debido a la alta variabilidad del numero de frutos con los que se inicio el experimento. Para la segunda cosecha de cafe del año 2001, se encontraron porcentajes de mortalidad de broca con las dos especies entre el 53 y el 88%, un mes despues de aplicacion, siendo diferentes esladisticamente (p<0,05) en relacion con el testigo (6%). Cinco de los seis tratamientos evaluados presentaron porcentajes promedios de infestacion por broca en el arbol (PPIA), inferiores al testigo 9,93 ± 1,81 (prom ± E. E), destacandose las aplicaciones de Steinernema sp. (500.000 Jl/plato) con una infestacion por broca de 4,17 ± 0,57 y para Heterorhabditis sp. (250.000 Jl/plato) con una infestacion por broca de 5,62 ± 1,24. Esta reduccion para cada uno de los casos equivale al 58 y 43,4%, respectivamente con relacion al testigo. Dicha disminucion puede explicarse, al observar los porcentajes de mortalidad promedios de estados de broca en frutos del suelo (PMB), que fluctuaron entre el 13,64 y el 42,27% para ambas especies de nematodos. A los 30 dias despues de la aplicacion, esta diferencia es notoria, encontrando diferencias signiflcativas con el testigo (p<0,05). En conclusion estos nematodos penetran los frutos brocados en el suelo, parasitan principalmente estados inmaduros, se reproducen en estos insectos parasitados y reducen poblaciones de broca en los cafetales.

The effect of two native entomopathogenic nematodes Heterorhabditis sp. (Rhabditida: HeteroRhabditidae) and Steinernema sp. (Rhabditida: Steinernematidae) was studied in doses of 125.000, 250.000 and 500.000 infective juvenils (U) per tree base on populations of the coffee berry borer, llypothenemus hampei. During the first coffee harvest of 2001, there were no statistical differences between treatments for infestation level in the tree due to the high variability of the number of fruits with which the experiment began. For the second coffee harvest of 2001, percentage of mortality of the coffee berry borer with the two species was 53 and 88%, a month after their application, statistically different (p<0,05) in relation to the control (6%). Five of the six evaluated treatments had average percentages of borer infestation in the tree (PPIA) lower than the control 9,93 ± 1,81 (mean ± S. E), particularly the applications of Steinernema sp. (500.000 U/plate) with a PPIA of 4,17 ± 0,57 and Heterorhabditis sp. (250.000 U/plate) with PPIA of 5,62 ± 1,24. This reduction is equivalent to 58 and 43,4%, respectively, in relation to the control. This reduction can be explained by observing the mean percentages of mortality of coffee berry borer life stages in fruits on the ground (PMB), which fluctuated between 13,64 and 42,27% for each species of nematodes. Thirty days after application, this difference is well established, with significant differences compared to the control (p<0,05). In conclusion, these nematodes penetrate the fallen fruits on the ground, mainly parasitize immature stages and reproduce in these insects within the fruit to reduce the populations of coffee berry borer in coffee plantations.

**Evaluation of larvicidal activity of polar and nonpolar extracts from acetogenins of Annona muricata on Aedes aegypti and Anopheles albimanus larvae (Diptera: Culicidae)**

Muchas especies de plantas superiores producen metabolitos secundarios, a los cuales se les atribuye funciones ecologicas y de defensa contra microorganismos y fitofagos. El objetivo de este trabajo fue conocer la susceptibilidad de larvas de Ae. aegypti y An. albimanus a dos tipos de extractos de acetogeninas obtenidos de semillas de Annona muricata. Las dos especies de Culicidae estudiadas fueron altamente susceptibles a ambos tipos de extractos bajo condiciones de laboratorio. Las concentraciones letales medias (CL50) para los extractos polar, no polar y mezcla de acetogeninas para Ae. aegypti fueron de 74,7 ppm, 236,2 ppm y 20,3 ppm, respectivamente, mientras que en An. albimanus fueron de 0,8 ppm, 16,2 ppm y 1,4 ppm. Se presentan las dosis diagnosticas y su respectivo rango de variacion. Las diferencias entre la mortalidad producida por los extractos no fueron estadisticamente significativas. Una eleccion para su utilizaciòn, podra ser determinada posteriormente cuando se evalùe la residualidad de ambos compuestos y la relaciòn costo beneficio.

Many species of higher plants produce secondary metabolites, to which ecological functions and defense against microorganisms and phytophages are attributed. The objective of this work was to understand the susceptibility of Ae. aegypti and An. albimanus larvae to two types of acetogenins extracts obtained from seeds of Annona muricata. The two species of Culicidae studied were highly susceptible to both kinds of extracts under laboratory conditions. The mean lethal concentrations (CL50) for the polar, nonpolar and mix of acetogenins extracts for Ae. aegypti were 74,7 ppm, 236,2 ppm and 20.3 ppm, respectively, while in An. albimanus they were 0,8 ppm, 16,2 ppm and 1,4 ppm. The diagnostic doses are presented with their respective range of variation. The differences in mortality produced by the extracts were not statistically significant. An option for its use could eventually be determined when the residuality of both compounds and the costbenefit ratio are, evaluated.

**Determination of the preferred sugar in the diet of Lutzomyia evansi (Nuñeztovar) (Diptera: Psychodidae)**

Los azucares han sido señalados por jugar un papel clave en la biologia y relacion parasito Leishmania - hospedador. Bajo condiciones experimentales se preciso el azucar de preferencia en la dieta de Lutzomyia evansi vector alterno de Leishmania chagasi. A hembras de una colonia de L. evansi y hembras silvestres, postdeprecion de azucares naturales, se les ofreciò a la vez y durante 72 h: fructosa, sacarosa, melezitosa. glucosa, galactosa y maltosa debidamente marcados con colorantes vegetales; bajo lupa binocular se determino el azucar ingerido por el color presente. Los resultados se compararon con los obtenidos con hembras de colonia de L. longipalpis. De 618 hembras de L. evansi ensayadas, en 340 se detecto fructosa (55%) indistintamente del colorante empleado seguido por melezitosa (18,6%) y sacarosa (15,5%). Resultados similares fueron obtenidos con 199 hembras de colonia. En contraste, L. longipalpis prefirio sacarosa (34%), seguida de glucosa (29%) y fructosa (24%). La prueba de antrona evidencio en hembras silvestres la presencia de fructosa en 55,5% de la muestra. Estos hallazgos son relevantes para la biologia de la especie y pudieran ser significativos en el establecimiento y patron de desarrollo del parasito dentro del insecto vector.

Sugars have been shown to play an important role in the biology and relationship between the host and parasitic Leishmania. Under experimental conditions the preferred sugars in the diet of Lutzomyia evansi, alternate vector of Leishmania chagasi. were determined. After the depletion of their natural sugars, females from the wild and females from a colony of L. evansi were periodically offered, over a period of 72 hours, fructose, saccarose, melezitose, glucose, galactose and maltose, identified by different vegetable colorings; the ingested sugar was determined by its color under a binocular magnifying glass. The results were compared with those from a colony of L. longipalpis. Of 618 wild L. evansi studied, fructose was detected in 340 females (55%), regardless of the color used, followed by melezitose (18,6%) and saccarose (15,5%). Similar results were obtained from 199 females from the colony. In contrast, L. longipalpis preferred saccarose (34%), followed by glucose (29%) and fructose (24%). The anthrone test detected the presence of fructose in 55,5% of the sample of females from the wild. These discoveries are relevant to the biology of the species and could be significant in the establishment and pattern of parasite development inside the insect vector.

Trichoptera of he Santuario de Iguaque (Boyaca, Colombia) in relacion to water quality

Se presenlan los resultados obtenidos durante la investigacion realizada en algunos de los principales cuerpos de agua del Santuario de Fauna y Flora de Iguaque, Boyaca: Quebradas Carrizal, Mamarramos Colorada y rio Cane, donde se analizaron aspectos fisico - quimicos y composicion de la tricoptero fauna bajo la tecnica de recolecciòn de coriotopos, durante los meses de septiembre de 2001 a abril de 2002. Se realizaron tres muestreos cubriendo temporadas de alta y baja precipitacion, con el fin de analizar algunos aspectos fisicoquimicos y la composicion de la tricopterofauna. Se encontro que el regimen pluviometrico incide sobre las condiciones biologicas y fisico-quimicas ocasionando disminucion en la abundancia de la comunidad de tricopteros durante los meses de alta precipitacion (abril - mayo) y un aumento de la abundancia cuando disminuyen las lluvias. En todos los sistemas se registraron 3.281 individuos distribuidos en 10 familias y 19 generos, se destacan por su abundancia los generos Contulma y Ochrotrichia, con 45,68 y 16,36%, respectivamente. Se informaron como registros nuevos para la zona a los generos Culoptila y Metrichia. De otro lado, son considerados como posibles bioindicadores para la zona algunas especies de los generos: Contulma, Ochrotrichia, tlelicopsyche y Mortoniella.

Results are presented that were obtained during research conducted in some of the main bodies of water in the Iquaque Fauna and Flora Sanctuaries, Boyaca: Carrizal, Mamarramos, Colorada mountain streams and the Cane River. The physical-chemical characteristics and composition of the thrichopteran fauna were studied using the choriotopes sampling technique during the months from September 2001 to April 2002. Three samples were taken covering periods of high and low precipitation in order to analyze some physical and chemical elements and composition of thrichopteran fauna. It was found that rain regime had an influence on the biological and physical chemical conditions causing a reduction in the abundance of the thrichopteran community during the months of high precipitation (April-May) and an increase in abundance when rains decreased. In all of the systems, 3.281 individuals distributed in 10 families and 19 genera were recorded. The genera Contulma and Ochrotrichia were predominant, with 45,68 and 16,36%, respectively. Culoptila and Metrichia were reported as new records for the zone. On the other hand, some species of the genera Contulma, Ochrotrichia, tlelicopsyche and Mortoniella are considered as possible bioindicators for the zone.

**Biologic studies of Copitarsia sp. (Lepidoptera: Noctuidae) under insectarium conditions**

Las cruciferas son una fuente importante de fibra y vitaminas en la dieta del pueblo Colombiano. Su produccion se ve afectada por plagas como Copitarsia sp. que deterioran la cabeza o florete. En este trabajo se estudiaron parametros como fecundidad, fertilidad, mortalidad, proporcion de sexos y ciclo de vida de Copitarsia sp., cuyo conocimiento ayuda al manejo de la plaga. Los estudios se realizaron bajo condiciones naturales de temperatura y humedad relativa en el ICA CA. "Tulio Ospina", uhicado en el municipio de Bello, Antioquia. Los adultos utilizados para estudiar la fecundidad se introdujeron en porrones confiteros que contenian acordeones de papel para la oviposicion. Para el ciclo de vida se partio de una cohorte de 407 huevos, los cuales se mantuvieron individualmente en recipientes plasticos. Cada hembra en promedio puso 550,5 huevos, los cuales tuvieron una fertilidad del 92,87%. La proporcion de sexos fue de 1:1. La mortalidad acumulada en todos los estados de desarrollo fue del 38,82%. El ciclo de vida desde huevo hasta emergencia del adulto duro 45,94 ± 2,5 dias. La incubacion de huevos fue 5,037 ± 0,21 dias. El periodo larval consto de 5 o 6 instares, con duraciones parciales de: LI: 3,80 ± 0,73 dias, L2: 2,80 ± 0,55 dias, L3: 2,97 ± 0,70 dias, L4: 3,12 ± 0,80 dias, L5: 4,91 ± 1,60 y L6: 5,55 ± 0,35 dias; la prepupa y pupa tuvieron duraciones de 2,40 ± 0,62 y 19,26 ± 1,16 dias, respectivamente y el adulto de 15,26 ± 5,37 dias.

The crucifers are an important source of fiber and vitamins in the Colombian diet. Their production is affected by pests like Copitarsia sp., which causes damage to the head or florets of the plant. In this study, parameters like fecundity, fertility, mortality, sex ratio and life cycle of Copitarsia sp. were analyzed because they will support pest management. The study was conducted in ICA "Tulio Ospina" located in Bello, Antioquia under natural conditions of temperature and relative humidity. The adults used to study fecundity were introduced into glass flasks that contained accordion paper used for oviposition. The life cycle began with a cohort of 407 eggs, which were kept in individual plastic containers. Each female lay an average ot 550,5 eggs, which had a fertility of 92,87%. The sex ratio was 1:1 The accumulated mortality in all the developmental stages was 38,82%. The life cycle from egg to adult was 45,94 ± 2,5 days. Egg incubation was 5,037 ± 0,21 days. The larva! period had 5 or 6 instars, with partial durations of: LI 3,80 ± 0,73 days, L2 2,80 ± 0,55 days, L3 2,97 ± 0,70 days, L4 3,12 ± 0,80 days, L5 4,91 ± 1,60 days and L6 5,55 ± 0,35 days; the prepupa and pupa had durations of 2,40 ± 0,62 days and 19,26 ±1,16 days, respectively, and the adult 15,26 ± 5,37 days.

**Studies of the habits and behavior of the Guatemalan potato tuber moth Tecia solanivora (Lepidoptera: Gelechiidae) in stored potato**

Esta investigacion permitio conocer aspectos generales de los habitos de oviposicion y comportamiento de la polilla guatemalteca Tecia solanivora (Povolny) en papa almacenada. Dichos aspectos comprendieron la determinacion de la capacidad de daño de la plaga, los sitios preferidos para ovipositar tanto en una pila como en el tuberculo y la influencia del estado de limpieza de los tuberculos almacenados en los habitos de oviposicion, El estudio se llevò a cabo en el Centro de Investigacion Tibaitata, en el programa MIP de Corpoica y se desarrollo bajo condiciones controladas de temperatura, humedad y luminosidad. La unidad experimental consistio en una jaula de madera con paredes de muselina, dentro de la cual se introdujo una bandeja con 100 tuberculos con un peso promedio de 100 g cada uno. En la determinacion de la capacidad de daño de la plaga se encontro que 10 parejas de la polilla guatemalteca liberadas sobre una masa de 100 tuberculos, producen un daño superior al 35%. En la determinacion de los sitios de oviposicion se encontro que las hembras de T. solanivora prefieren colocar sus posturas principalmente debajo de la tierra adherida a los tuberculos, alrededor de la zona de las yemas de estos y en los tuberculos ubicados en los lugares mas protegidos de un monton de papa. En cuanto al estado de limpieza de los tuberculos se determino que la hembra prefiere ovipositar en la papa sucia comparada con la papa limpia.

This research elucidated general aspects of the habits of oviposition and behavior of the Guatemalan potato tuber moth Tecia solanivora (Povolny) in stored potato. These aspects included determination of the pest's damage capacity, preferred oviposition sites in stows as well as the tuber, and influence of the state of cleanliness of the stored tubers on oviposition habits. The study was conducted at the Tibaitata Research Center, in the IPM program of Corpoica and was carried out under controlled conditions of temperature, humidity and light. The experimental unit consisted of a wooden cage with muslin walls, in which a tray was introduced with 100 tubers, of 100 g average weight each. In the determination of the damage capacity of the pest it was found that 10 pairs of the Guatemalan potato tuber moth released on 100 tubers, produce over 35% of damage. Females T. solanivora prefer to oviposit mainly under the soil adhered to the tubers, around the area of the buds of the tuber and in the tubers located in the most protected places of the potato stow. As for the state of cleanliness of the tubers, it was found that the female prefers to oviposit in dirty tubers compared to clean tubers, therefore the total number of eggs placed on the same resource is higher in dirty potatoes.

**Introduction and evaluatiòn of Phymastichus coffea (tlymenoptera: Eulophidae) in smallholder coffee farms, through participatory research**

Cenicafe en convenio con el ICO-CFC-CABI Bioscience adelanto un proyecto de investigacion participativa con pequeños caficultores de Caldas, Quindio y Risaralda relacionado con el manejo de la broca del cafe. Durante este proyecto se realizaron las primeras liberaciones de Phymastichus coffea (La Salle) en Colombia, con el proposito de darlo a conocer a los caficultores. iniciar su introduccion y evaluar su establecimiento. En el estudio se consideraron 41 fincas localizadas entre 1.200 y 1.800 m de altitud. Durante 20 meses el manejo de la broca se baso en recolecciones frecuentes de cafe maduro y en liberaciones de P. coffea. Los caficultores realizaron evaluaciones de infestacion de broca, posiciones de penetracion en los frutos y colectaron frutos infestados para evaluar el establecimiento del parasitoide. En total se colectaron 455 muestras de frutos infestados. En el 49,2% (N = 224) de las muestras se observò la presencia de P. coffea. Se detectò la presencia de P. coffea hasta 14 meses despues de la ultima liberacion. En las fincas de los municipios de Balboa, Montenegro y Belalcazar se observaron los parasitismos mayores 5,6, 5,6 y 4.7% en promedio, respectivamente. En contraste, las fincas de los municipios de Riosucio. Buenavista y Santa Rosa de Cabal presentaron parasitismos menores 0,7, 1,3 y 1,9% en promedio. respectivamente. El parasitismo maximo fue 42%. Es importante resaltar la presencia de P. coffea en el 87,5% de los predios en donde fue liberado, ya que se demuestra que se puede establecer en los agroecosistemas cafeteros del pais.

In collaboratiòn with ICO-CFC-CABI Bioscience, Cenicafe conducted a farmer participatory research project with smallholder coffee growers in Caldas, Quindio and Risaralda, related to the management of the coffee berry borer. During this study the first release of Phymastichus coffea (La Salle) was made in Colombia with the main purpose of allowing farmers to learn about this parasitoid, initiate its introduction, and evaluate its establishment. Forty-one coffee farms participated in the study, which were located between 1.200 and 1.800 meters elevatiòn. For 20 months coffee berry borer management was based on frequent harvests of mature coffee and releases of P. coffea. Farmers made evaluatiòns of insect infestaciòn, positions of borer penetratiòn in the berry and collected infested berries to evaluate the parasitoid establishment. Altogether 455 samples of infested berries were collected. In 49,2% (N = 224) of the samples the presence of P. coffea was observed. The presence of P. coffea was detected up to 14 months after the last release. In farms of Balboa, Montenegro and Belalcazar, the highest parasitism was observed: mean of 5,6. 5,6 and 4,7%, respectively. In contrast, farms of Riosucio, Buenavista and Santa Rosa de Cabal, had lower parasitism: mean of 0,7. 1,3 and 1,9%. respectively. Maximum parasitism observed was 42%. It is important to emphasize that P. coffea was present in 87,5 % of the farms where it was released, demonstrating that it can be established in the coffee agroecosystems of the country.

Survey of the natural enemies of the crazy ant, Paratrechina fulva (Hymenoptera: Formicidae), in the municipality of El Colegio (Cundinamarca) and in the Cauca River valley

La hormiga loca (HL) representa un problema ambiental, social y economico ante el cual se ha planteado la necesidad de realizar la busqueda de enemigos naturales que puedan convertirse en reguladores de sus poblaciones. Con este fin, se hizo un reconocimiento de estos, mediante la observacion visual y captura de la HL, y otras hormigas en dos zonas: en el Colegio (C/marca) como representante de una zona otrora invadida por altas poblaciones de la plaga, y el valle geografico del rio Cauca. donde hay sectores actualmente afectados por esta. En elColegio, no se capturò a la HL, pero si a un buen niimero de especies pertenecientes a otros generos y subfamilias. Bajo estas condiciones, no hubo forma de detectar a los enemigos naturales, pero si concluir que hubo un restablecimiento del equilibrio junto con la desaparicion de la HL, hasta el momento sin explicacion clara. En el valle geografico del rio Cauca no se encontraron entomopatogenos ni parasitoides distintos al cicaro Macrodinychus sellnicki, que se hallo parasitando desde 0 hasta 82% de las pupas de la HL, en el ingenio Risaralda y en INCAUCA S.A., respectivamente. En observaciones de campo se logro detectar a la hormiga legionaria Labidus pos. coccus, depredadora especialmente de hormigas, en nidos de la HL. Ademas, en el ambiente menos distuibado de los estudiados, la madrevieja La Trozada, se encontrò la presencia de la HL con otras hormigas nativas, en un estado en donde la competencia por los recursos se constituye en un elemento importante para la regulacidn de las poblaciones de la plaga. Estas situaciones sugieren que las altas infestaciones de la HL no son permanentes y su duraciòn esta influenciada por las caracteristicas propias de los sitios que invade. La importancia de los enemigos naturales radicaria en debilitar las poblaciones de la HL, permitiendo que sus competidores, especialmente otras hormigas. terminen por minimizarlas en la zona afectada.

The crazy ant (CA) has become an environmental, social and economic problem and there is a need to explore for natural enemies that might regulate its populations. With that objective, a survey was conducted by means of visual observation and captures of CA and other ants in two zones: El Colegio (Cundinamarca) representing a zone once highly infested by this pest and the Cauca River Valley where there are areas currently affected by the CA. CA was not caught in El Colegio but a large number of ant species belonging to other genera and subfamilies were collected. Under these conditions it was not possible to detect natural enemies, but equilibrium was reestablished together with the disappearance of CA, with no clear explanation up to now. In the Cauca Valley, no pathogens and parasitoids were found other than the mite Macrodinychus sellnicki. which was found parasitizing 0 to 82% of CA pupae in the Risaralda and INCAUCA. 5. A. sugar mills, respectively. In field observations the army ant, Labidus pos. coecus, which feeds on others ants was detected in CA nests. In the least disturbed sampled, La Trozada, CA was detected in the presence of other native ants, in a situation where competition for resources constitutes an important element in the regulation of pest populations. These situations suggest that high levels of CA infestation are not permanent and their duration is influenced by characteristics of the areas they invade. The importance of natural enemies is that they weaken CA populations, allowing competitors, particularly other ants, to reduce them in infested areas.

The hymenopterans associated with an agroforestry plot of Borojoa patinoi, Cedrela odorata, Apeiba aspera and Inga spectabilis at the farm of the University of Choco, municipality of Lloro, Choco

La investigacion se efectuo en la granja de la Universidad Tecnologica del Choco, municipio de Lloro, a 90 msnm y 24°C Se realizaron muestreos durante 12 meses, mediante recorridos periodicos en cada una de las especies vegetales; se capturaron en forma directa los insectos presentes en las estructuras de las plantas. Se compare la diversidad de himenopteros en el componente agricola y forestal; ademas, se realizo la caracterizacion trofica de himenopteros en la parcela. Se identificaron 40 especies, distribuidas en 8 familias. con 57,5% perteneciente a la familia formicidae, seguida de Apidae con 17,5%, Ichneumonidae con 10% y Vespidae con 5%; el 10% restante compartido por Argidae, Braconidae. Mymaridae y Pompilidae. Borojoa patinoi registrò la mayor diversidad y Apeiba aspera la menor. El 44,4% de las especies son comunes en los cuatro componentes vegetales. En el grupo de los fitofagos, los lamedores de nectar y los polinofagos fueron los mas representativos con 17,5% cada uno. En los entomofagos predominaron los depredadores con 32,5%. La abundancia de los insectos estuvo relacionada con la fenologia de las especies vegetales presentes en la parcela; es asi como B. patinoi, Cedrela odorata e Inga spectabilis comparten los periodos de rebrote y floracion entre abril y mayo cuando la abundancia de himenopteros, asi como la de sus enemigos naturales, es la mas alta. Las especies mas abundantes fueron Eulaema meriana , Lestrimelitta limao (primeros registros para el Chocò) y Sericomyrmex sp. (primer registro del genero para el Chocò). Igualmente, se identificò una especie de interes economico, Atta cephalotes, debido al daño que causa en frutos de B. patinoi.

This research was conducted on the farm of the "Universidad Technological del Choco", municipality of Lloro. 90 elev. and 24°C. Surveys were conducted over twelve months by periodically sampling each of the plant species selected; insects were directly captured from plant structures. The diversity of hymenopterans between forest and agricultural components was compared; in addition, the trophic groups for hymenopterans from each parcel were established, forty species were identified, distributed in 8 families, with 57,5% of the species belonging to the family formicidae; followed by Apidae with 17,5%, Ichneumonidae with 10% and Vespidae with 5%; the remaining 10% belonged to Argidae, Braconidae, Mymaridae and Pompilidae. Borojoa patino had the highest diversity of Hymenoptera and Apeiba aspera the lowest. About 44,4% of the insect species were common to all four plant components. Among the phytophagous insects, nectar and pollen feeders were the most representative with 17,5% each. Among the entomophagous insects, predators predominated with 32,5%. Abundance of the insects was associated with the phenology of the plant species in the parcel. B. patinoi, Cedrella odorata and Inga spectabilis shared the same periods of regrowth and flowering between April and May, when the abundance of Hymenoptera and their natural enemies was highest. The most abundant species were Eulaena meriana , Lestrimelitta limao (first reports for Choco) and Sericomyrmex sp. (first report of the genus for Choco). One economically important species, Atta cephalotes, was identified because of its damage to 6. patinoi fruits.