Revista de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia

EL ÍNDICE H: UNA FORMA OBJETIVA DE EVALUAR LA PRODUCCIÓN CIENTÍFICA DE UN INVESTIGADOR

AISLAMIENTO, CARACTERIZACIÓN Y POTENCIAL DE DIFERENCIACIÓN DE CÉLULAS MADRE MESENQUIMALES CANINAS DERIVADAS DE TEJIDO ADIPOSO

Se caracterizaron células obtenidas del tejido adiposo subcutáneo de caninos para demostrar su naturaleza de células madre mesenquimales (ad-MSCs). Las células se cultivaron y expandieron bajo condiciones in vitro. Se determinó la presencia de marcadores de superficie CD73, CD90 y CD105 por citometría de flujo y PCR en tiempo real, siendo idéntico el perfil de expresión obtenido al reportado en células madre mesenquimales humanas. Se demostró su potencial de diferenciación mediante análisis de expresión génica por PCR en tiempo real luego de inducirlas a procesos de diferenciación osteogénica y adipogénica. La capacidad de diferenciación osteogénica se evidenció a través de la expresión de genes de tejido óseo (colágeno tipo I y osteonectina) en una cinética de expresión concordante con los eventos moleculares y celulares del desarrollo óseo in vivo. El potencial adipogénico se evaluó por la formación de vacuolas lipídicas intracelulares y la expresión del gen de lipoprotein-lipasa, acorde con el proceso in vivo. Se concluye que las células mesenquimales obtenidas del tejido adiposo de caninos cumplen los criterios morfológicos, de expresión de marcadores de superficie específicos y de capacidad de diferenciación mesodérmica, confirmando su naturaleza de células madre mesenquimales. Los resultados del presente trabajo indicaron que las ad-MSCs de los caninos son un excelente modelo preclínico para el desarrollo de aplicaciones en medicina regenerativa, tanto en medicina veterinaria, como en medicina humana.

Cells obtained from the canine subcutaneous adipose tissue were characterized to demonstrate the nature of mesenchymal stem cells (adMSCs). The cells were cultured and expanded in vitro conditions. The presence of the surface markers CD73, CD90 and CD105 by flow cytometry and real time PCR was determined. The expression profile is identical to that reported in human mesenchymal stem cells. The differentiation potential was demonstrated by gene expression by real time PCR after induction osteogenic and adipogenic. Osteogenic differentiation was evidenced by the expression of genes of bone tissue (type I collagen and osteonectin) in expression kinetics consistent with the molecular and cellular events of bone development in vivo. In the adipogenic differentiation, were the formation of intracellular lipid vacuoles and expression of lipoprotein lipase gene (LPS), according to the in vivo process. We conclude that mesenchymal, cells derived from adipose tissue of dog, meet the morphological criteria, expression of specific surface markers and mesodermal differentiation capacity, confirming the nature of mesenchymal stem cells. The canine mesenchymal stem cells are an excellent preclinical model for developing applications in regenerative medicine that can be used both in veterinary and human medicine.

ESTUDIO SEROLÓGICO DE BRUCELOSIS CANINA EN DOS ALBERGUES DEL MUNICIPIO DE ENVIGADO, COLOMBIA (2011)

El objetivo de este estudio fue buscar la presencia de anticuerpos de brucelosis en la población de dos albergues caninos del municipio de Envigado (Antioquia, Colombia) y a tal fin se seleccionaron 54 perros. Se tomaron muestras sanguíneas en 10 machos y 44 hembras que fueron procesadas bajo la técnica de inmunocromatografía para Brucella canis. No hubo diferencia estadística entre albergues en los parámetros ‘sexo’ y ‘raza’ de cada grupo de estudio y tampoco se encontró evidencia serológica de la presencia de brucelosis canina en el grupo de animales muestreados. Los resultados indican que, aunque los animales permanecieron en calidad de abandono durante un período de su vida, su condición feral no era permanente debido a que en el momento del estudio se encontraban en albergues. Las políticas intensivas de recolección se orientan más a la atención de mascotas abandonadas que a aquellos animales ferales (los cuales, con mayor frecuencia, pueden ser portadores de la enfermedad). El tipo de población incluida en el estudio, sumado a la práctica estricta de esterilización inmediata dentro del albergue -que a su vez impide los apareamientos entre individuos-, pueden incidir en la reducción la propagación de la enfermedad en el municipio.

The objective of this study was to search the presence of antibodies of canine brucellosis in the population of two hostels in the municipality of Envigado (Antioquia, Colombia). For this were chosen 54 dogs of two canine shelters. They were taken blood samples in 10 males and 44 females, and they were processed under the immunochromatography technique for Brucella canis. There was no statistical difference between the parameters hostels in sex and race of each study group and no serologic evidence was found of the presence of canine brucellosis in canines sampled group. The results indicate that although the animals remained in quality of abandonment in a period of his life, his feral condition was not permanent since they were in shelters at the time of the study. The intensive policies of collecting from patients, is oriented more to care for pets abandoned, but not for ferine animals (which may be carriers of the disease more frequently). The type of population included in the study, added to the strict practice of immediately sterilization within the shelter -which in turn prevents the mattings between individuals-, both may be reducing the spread of the disease in the municipality.

**LIPOPOLISACÁRIDOS DE E. coli AUMENTAN LA EXPRESIÓN MOLECULAR DE PßD-2 EN YEYUNO DE LECHONES POSDESTETE**

Objetivo: Evaluar el efecto de la inflamación en yeyuno inducida por LPS de E. coli sobre la expresión molecular de PβD-2 en lechones posdestete. Materiales y métodos: el trabajo de campo se realizó en el Centro de Producción San Pablo de la Universidad Nacional de Colombia, sede Medellín. El estudio se realizó con 32 cerdos destetados a los 21 días de edad, los cuales fueron alimentados durante 10 días con una dieta basal que tuvo como componentes leche y algunos de sus derivados, y que además cumplía con todos los mínimos nutricionales. Los cerdos fueron sacrificados escalonadamente los días 1, 5, 7 y 10 posdestete y se les extrajo completamente el yeyuno. Para inducir la inflamación intestinal los animales fueron alimentados con la dieta basal adicionada con 0.3 µg de LPS/mg de alimento. El diseño estadístico utilizado fue de bloques al azar en arreglo factorial de 2x4. Resultados: Se observó un aumento (P<0.01) en la expresión de PβD-2 en los animales que consumieron la dieta con mayor nivel de inclusión de LPS. Conclusiones: Los LPS de E. coli promueven la expresión molecular de PβD-2 secretada para la defensa intestinal; esto lleva a un desequilibrio en la diferenciación celular a nivel intestinal, lo cual podría provocar la presentación de cambios morfológicos intestinales, como disminución en la altura de las vellosidades e incremento en la profundidad de las criptas, además de reducir en las actividades enzimática y absortiva de nutrientes, lo que deriva en diarrea.

Objective: To evaluate the effect on jejunum inflammation induced by consumption of E. coli LPS on PβD-2 molecular expression in weaned piglets. Materials and methods: The experiment was conducted in San Pablo Production Center of the Universidad Nacional de Colombia (Medellin). 32 weaned pigs at 21 days of age were used. Animals were fed for 10 days with a basal diet of milk and some of its derivatives, and that also fulfilled all and 10 days after weaning and a complete extraction of jejunum was realized. To induce intestinal inflammation animals were fed a basal diet supplemented with 0.3 µg de LPS/mg feed). A randomized block design in a 2x4 factorial arrangement was used. Results: There was increase (P<0.01) in PβD-2 molecular expression in animals fed the diet with higher levels of inclusion of LPS. Conclusions: LPS from E. coli increases expression of PβD-2 secreted to the intestinal defense, this leads to imbalance in cellular differenthe nutritionals minimums. Pigs were sequentially slaughtered on days one, five, seven, tiation in the intestine. This cellular imbalance may cause the presentation of intestinal morphological changes characterized by the decrease in villus height and increased crypt depth, reduction in enzyme activity and nutrient absorption, and eventually diarrhea.

INFECCIÓN POR PROTOZOARIOS EN INDIVIDUOS DE TITÍ BEBE LECHE -S. fuscicollis-, TITÍ CABEZA BLANCA -S. oedipus-, TITÍ ARDILLA -S. sciureus-, SURICATO -S. suricatta- Y WALLABIE DE BENNETT -M. rufogriseus-: DESCRIPCIÓN DE CASOS

La toxoplasmosis es una de las zoonosis parasitarias más comunes y de especial atención en medicina humana y veterinaria en todo el mundo. Toxoplasma gondii comparte muchos de sus parámetros biológicos con otros parásitos apicomplexa, pero es único por su extremadamente amplio rango de huéspedes y su especificidad tisular. La susceptibilidad en especies de primates del Nuevo Mundo y diprotodontos a la infección por protozoarios es alta. Bajo condiciones de cautiverio la toxoplasmosis es una de las infecciones más comunes en macrópodos australianos. En el presente trabajo se exponen los hallazgos clínicos y postmortem de 11 individuos de primates (Saguinus oedipus, S. fuscicollis, Saimiri sciureus), carnívoros (Suricata suricatta) y diprotodontos (Macropus rufogriseus), de la Fundación Zoológica de Cali, diagnosticados con toxoplasmosis mediante métodos paraclínicos e histopatológicos. En la mayoría de los casos el cuadro clínico se caracterizó principalmente por disnea, secreción nasal espumosa y signos neurológicos. Los hallazgos más importantes de la necropsia fueron lesiones en pulmón, hígado y encéfalo. Los casos aquí descritos corresponden a cuadros clínicos de ocurrencia natural y permiten entender el desarrollo fisiopatológico y la presentación clínica de las infecciones por protozoarios en especies de fauna silvestre, a pesar de la falta de un diagnóstico definitivo mediante técnicas específicas de inmunohistoquímica para las distintas etiologías.

Toxoplasmosis is one of the most common parasitic zoonoses with special attention in human and veterinary medicine around the world. Toxoplasma gondii shares many biological features with other apicomplexa parasites, but is the unique in its extremely wide host range and tissue specificity. The susceptibility to protozoan infection of the New World primate species and Diprotodontia is high. Under captivity conditions, toxoplasmosis is one of the most common infections in australian Diprotodontia. In this paper are exposed clinical and postmortem findings of 11 Primates (Saguinus oedipus, S. fuscicollis, Saimiri sciureus), Carnivora (Suricata suricatta) and Diprotodontia (Macropus rufogriseus), from Zoological Foundation of Cali diagnosed by paraclinic and histopathological methods as toxoplasmosis. Most of cases the clinical picture was mainly characterized by dyspnea, foamy nasal discharge and neurological signs. At the necroscopy, the most important findings were pulmonary, hepatic and encephalic lesions. The cases in this paper are an approach to understanding the pathophysiologic course and the clinical presentation of protozoa infections in wildlife species, despite the lack of definitive diagnosis through specific inmunohistochemical techniques to the different etiologies.

CRISTALIZACIÓN ALTAMENTE SIMÉTRICA CON SEIS EJES RECTILÍNEOS Y BIEN DEFINIDOS HALLADA EN MOCO CERVICAL BOVINO OBTENIDO EN ESTRO

Bovine cervical mucus (BCM) is important for selection and transport of spermatozoa. When air-dried, BCM obtained at oestrus exhibits arborescent crystallizations, among other arrangements. Considering the relevant endocrine and reproductive information indirectly obtained from BCM crystallization, a morphological investigation was carried out to study its crystalline patterns. BCM samples were collected from healthy Holstein Friesian heifers at oestrus, their crystalline patterns photographed and its morphology analyzed. The majority of the crystallizations obtained showed the typical tree-like patterns reported for BCM. However, a highly symmetrical arrangement was found, characterized by a star-like morphology with six straight, highly defined axes that protrude from the same central point, forming 60º angles. In terms of current knowledge, this short report is the first to show this crystallization geometry in BCM, which, additionally, is remarkably similar to P6B mucus reported for periovulatory human cervical mucus. Even though the role of mucus presenting this type of crystallization is as yet unknown for bovines, its possible functions are also briefly discussed here.

El moco cervical bovino es importante para la selección y el transporte espermático. El moco, obtenido durante el estro y secado al aire, exhibe cristalizaciones con formas principalmente arborescentes. Considerando la importante información endocrina y reproductiva que es posible obtener a partir de la cristalización del moco cervical, se efectuó una investigación morfológica con el propósito de estudiar sus patrones cristalinos. Las muestras de moco se obtuvieron de novillas Holstein Friesian en estro; posteriormente, los patrones de cristalización del moco fueron fotografiados para finalmente analizar su morfología. Las cristalizaciones obtenidas correspondieron a típicos patrones arboriformes previamente reportados. Sin embargo, lo que llamó la atención fue el hallazgo de un arreglo altamente simétrico en una novilla, caracterizado por una morfología similar a estrella con seis ejes rectos, bien definidos, que surgen desde el mismo punto central y forman ángulos de 60º. Según nuestro conocimiento, esta comunicación breve reporta por primera vez la presencia de dicha geometría de cristalización en vaquillas, la cual es muy semejante al patrón cristalino subtipo P6 reportado para el moco cervical perioBvulatorio humano. Si bien el rol ejercido por este tipo de cristalización de moco aún se desconoce en bovinos, se discuten aquí sus posibles funciones.

EFECTO DEL RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS SOBRE LA APTITUD QUESERA DE LA LECHE Y LA CALIDAD FISICOQUÍMICA Y SENSORIAL DEL QUESO CAMPESINO

Antecedentes: en Colombia, el alto recuento de células somáticas (RCS) en la leche es un problema para la industria lechera. Altos recuentos pueden afectar de manera considerable los rendimientos y calidad final del queso. Varios países han establecido límites máximos estandarizados para el RCS. Colombia no lo ha hecho de manera oficial y tan solo unas pocas industrias manejan sus propios límites. Objetivos: Determinar el efecto del RCS sobre parámetros de aptitud quesera de la leche y la calidad sensorial del queso campesino. Métodos: Se tomaron muestras de leche de seis tanques con altos y bajos RCS y se realizaron mezclas para obtener 30 baches con diferentes RCS (desde 150.000 hasta 1.200.000 cel/ml). Con estas mezclas se elaboraron 30 quesos tipo campesino a los cuales se les determinaron variables de aptitud quesera (tiempo de coagulación, rendimientos y pérdidas en suero) y la calidad organoléptica a través de una prueba sensorial descriptiva de puntajes con panel de seis jueces con experiencia previa y entrenados en queso campesino. Las variables de aptitud quesera fueron analizadas por regresión múltiple y los resultados de la evaluación sensorial con la prueba no paramétrica de Friedman. Resultados: La aptitud quesera disminuyó con RCS superiores a 200.000 cel/ml. El tiempo de coagulación (R² = 0.74; P< 0.001) y las pérdidas de proteína en el lactosuero (R² = 0.55; P<0,001) aumentaron, mientras que los rendimientos (R²=0.31; P<0.01) disminuyeron a medida que aumentó el RCS. La calificación de los panelistas respecto de la textura y la apariencia disminuyó con RCS mayores a 600.000 cel/ml (P<0.01) y el sabor y el aroma, a partir de 800.000 cel/ml (P<0,01). Conclusiones: Aumentos en el RCS en leche afectan negativamente parámetros de aptitud quesera y la calidad sensorial del queso campesino. Se sugiere que los impactos serán menores sobre el rendimiento cuanto menor sea el RCS, mientras que la calidad organoléptica mejorará cuando la leche tenga RCS por debajo de 600.000 cel/ml.

Background: A high milk somatic cell count (SCC) is a problem for milk industry in Colombia. These high counts can affect considerably yield and final quality of cheese. Several countries have established maximum limits for SCC. In Colombia these limits have not been established officially, only a few industries have their own limits. Objectives: To determine the effect of somatic cell count (SCC) on milk potential for cheese making and sensorial quality of fresh cheese. Methods: Six milk samples with high and low SCC, were taken from bulk tanks and mixed to obtain 30 samples with SCC of 150.000 to 1.200.000 somatic cells/mL. Thirty fresh cheeses were prepared and clotting time, yield (protein, fat, dry matter) and whey losses were determined. Additionally, score descriptive sensorial quality test was performed by 6 trained judges. Protein, fat, dry matter in milk and cheese yields were analyzed by multiple regressions and information of sensorial test by Friedman method. Results: When milk SCC (somatic cells/ml) increased from 150.000 to 1.200.000, clotting time (R² = 0,74; P<0.001), and whey protein losses increased (R² = 0.55; P<0.001) and cheese yield decreased (R²=0.31, P<0.01). According to panelists, texture and appearance were affected negatively when SCC was higher than 600.000 cells per ml (P<0.01), flavor and aroma when they were higher than 800000 cells/ml. Conclusions: Increases in SCC have a negative effect on milk potential for cheese making and quality sensorial parameters on fresh cheese. It is suggested that minor impacts in fresh cheese yield would be obtained with a lower SCC and for good sensorial quality when the milk has SCC, lower than 600.000 cells per ml.

**DESEMPEÑO PRODUCTIVO, COMPOSICIÓN Y BIODISPONIBILIDAD RELATIVA DE SELENIO EN TILAPIA NILÓTICA -Oreochromis niloticus- SUPLEMENTADA CON SELENIO ORGÁNICO E INORGÁNICO**

Se evaluó el desempeño productivo, la composición corporal y la biodisponibilidad relativa de selenio en tilapia nilótica (Oreochromis niloticus) suplementada con selenio dietario. Una dieta basal fue suplementada con selenio en forma de selenito de sodio o seleno-levadura en niveles crecientes de suplementación (0.00, 0.10, 0.20, 0.40, 0.80 y 1.60 mg/kg de dieta). Un total de 336 individuos de tilapia nilótica, con un peso inicial de 13.41±0.12 g, fueron distribuidos de forma aleatoria en 48 acuarios de vidrio (80 l, 4 réplicas, 7 peces por acuario). No se detectó selenio en el agua de abastecimiento. Los peces fueron alimentados hasta saciedad aparente 3 veces al día por un período de 9 semanas. El desempeño productivo de la tilapia nilótica no se vio afectado (P>0.05) por la suplementación con selenio dietario. El selenio corporal se incrementó de forma lineal (P<0.05) con la suplementación de selenio orgánico e inorgánico. La composición corporal de selenio fue menor (P<0.05) en los peces suplementados con selenito de sodio (1.67±0.14 mg/kg) en comparación con la seleno-levadura (1.95±0.21 mg/kg). A partir de la relación entre pendientes se estimó que la biodisponibilidad relativa de la seleno-levadura para la composición de selenio corporal fue de 155.72±0,10%, con relación al selenito de sodio (fijada en 100%). De acuerdo con los resultados, la concentración basal de selenio dietario (0.21 mg/kg) no limitó el desempeño productivo de tilapia nilótica. La suplementación con selenio orgánico (seleno-levadura) e inorgánico (selenito de sodio) entre 0.10 y 1.60 mg/kg no afectó el desempeño productivo de la tilapia nilótica.

The aim of this study was to evaluate the productive performance, whole body selenium retention and relative selenium bioavailability in Nile tilapia (Oreochromis niloticus). A practical basal diet was supplemented with either sodium selenite or seleno-yeast at tilapia fish (n=336) with an initial weight of 13.41±0.12 g were randomly distributed into forty-eight glass aquaria (80 l, 4 replicates, 7 fish per aquarium). There was no detectable selenium in supply water. Fish were fed the experimental diets to apparent satiation three times daily for nine weeks. Selenium supplementation did not affect the productive performance of Nile tilapia (P>0.05). Total whole body selenium increase linearly in response to dietary selenium supplementation (P<0.05). Fish fed sodium selenite had lower (P<0.05) whole body selenium (1.67±0.14 mg/kg) compared to fish fed seleno-yeast (1.95±0.21 mg/kg). Based on the slope-ratio assay for whole body selenium, the relative bioavailability of seleno-yeast was 155.72%±0.10 compared to sodium selenite (set at 100%). According to results the basal selenium content in expegraded selenium levels (0.0, 0.10, 0.20, 0.40, 0.80 and 1.60 mg/kg). Reversed Nile rimental diets (0.21 mg/kg) did not limit the productive performance of Nile tilapia. Supplementation of inorganic and organic selenium (0.10-1.60 mg/kg) did not affect the productive performance of Nile tilapia.