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Perfil de metabolitos de hojas de Passiflora mollísima utilizando UHPLC-ESI-MS y su potencial actividad ansiolítica en ratones

Abstract Background: Traditionally, extracts of Passiflora mollisima leaves are used as anxiolytics, but the existing metabolites are unknown. Objectives: To identify by UHPLC-ESI-MS/MS some of the metabolites and the anxiolytic activity of the leaf extract. Materials and Methods: The extract was subject to UHPLC-ESI-MS/MS analysis and administered intraperitoneally (VIP) to 4 groups of mice: G1: white group 0.1mL of saline solution, G2: positive control group 1mg Kg¯¹ of diazepam and to treatment groups, namely, G3 50 mg Kg¯¹ and G4 100 mg Kg¯¹ and anxiety levels were evaluated with the light/dark transition test for mice. Results: Six flavone C-glycosides were tentatively identified, namely vicenin 2, lucenin 2, schaftoside, orientin, vitexin, and glucopyranosyl methyl luteolin. Lower levels of anxiety were observed in animals of groups G3 and G4 based on the number of transitions, with a mean of 11±2 and 21±2, respectively, compared to G1, which was 2±1 (p<0.05). The groups displayed a significant difference among them (p<0.05). There was an increase in the total time spent in darkness in G3 and G4 Passiflora-treated mice with a mean of 70±8 and 113±8 respectively, compared to G1, which was 8±1 with a p<0.05. Conclusion: The metabolites identified have biological activities, neuroprotective, antioxidant, anti-inflammatory, antibacterial, and anticancer effects. The results of the effects of the 50mg Kg¯¹ and 100 mg Kg¯¹ doses of ethanolic extract of Passiflora mollisima leaves significantly decreased anxiety levels (p<0.05). This information contributes towards its further use in a therapeutic, clinical setting.

Resumen Tradicionalmente extractos de hojas de Passiflora mollísima son utilizados como ansiolíticos, pero se desconocen los metabolitos existentes. Objetivos: Identificar por UHPLC-ESI-MS/MS algunos de los metabolitos y la actividad ansiolítica del extracto de las hojas. Materiales y Métodos: El extracto se sometió a análisis UHPLC-ESI-MS/MS y se administró por vía intraperitoneal (VIP) a 24 ratones: Grupo 1 0.1 ml de sodio cloruro 0.9%. Grupo 2 control positivo 1mg Kg¯¹ de diazepam y a Grupo 3 una dosis de 50 mg Kg¯¹ y a Grupo 4 una dosis de 100 mg Kg¯¹ del extracto. Los niveles de ansiedad se evaluaron con la prueba de transición luz/oscuridad. Resultados: Se identificaron seis glucósidos C de flavona, vicenina 2, lucenina 2, schaftósido, orientina, vitexina y glucopiranosil metil luteolina. Se observaron menores niveles de ansiedad en los animales del grupo G3 y G4 en función del número de transiciones, con una media de 11±2 y 21±2, respectivamente, en comparación con G1 que fue de 2±1 (p<0,05). Los grupos mostraron diferencia significativa entre ellos (p<0,05), el tiempo total pasado en la oscuridad por los ratones G3 y G4 fué mayor con una media de 70±8 y 113±8 respectivamente, en comparación con G1 que fue de 8±1 con una p<0,05. Conclusión: Los metabolitos identificados se han relacionado con un amplio espectro de actividades biológicas, incluidas actividades neuroprotectoras, así como efectos antioxidantes, antiinflamatorios, antibacterianos y anticancerígenos. Los resultados de los efectos de las dosis de 50 mg Kg¯¹ y 100 mg Kg¯¹ de extracto etanólico de hojas de Passiflora mollisima disminuyeron significativamente los niveles de ansiedad (p<0,05), Esta información contribuye a su uso posterior en un entorno clínico terapéutico.

Efecto in-vitro del extracto metanólico de Morinda citrifolia sobre el ciclo de vida de Dermatobia hominis

Abstract Background: bovine cutaneous dermatobiosis or furuncular myiasis caused by Dermatobia hominis is a parasitosis that mainly affects bovines in the tropics and represents a particular interest in public health as zoonosis. Its control is based on ivermectins, which have long withdrawal times, affecting the productive dynamics within dairy cattle herds. Objective: to assess the in-vitro effect of the methanolic extract of the M. citrifolia ripe fruit against the life cycle of D. hominis. Methods: D. hominis larvae were taken directly from naturally parasitized bovine skins. These larvae were exposed by immersion to different concentrations of the methanolic extract of M. citrifolia (10, 50, 100, 200, 300, 400, 460 mg/mL) diluted in distilled water. Ivermectin 1% was used as a positive control, and distilled water as a negative control. Subsequently, the larvicidal activity was evaluated in the first 48 hours post-immersion (PI), the pupicidal activity within 10 to 23 days PI, and the inhibition of the imagos emergence as well as their anatomical alterations, were evaluated within 24 to 35 days PI; recreating the pupal development and their hatching in the soil under controlled laboratory conditions. CL50 and CL90 for the larvae phase were estimated through Probit regression analysis. Results: M. citrofolia concentrations of 400 and 460 mg/mL had a significant (p<0.05) larvicidal effect of 40% (95% CI 34.7 - 43.9) and 60% (95% CI 56.8 - 67.3), respectively. The pupicidal effect on the surviving larvae was significant (p<0.05) at 300, 400, and 460 mg/mL: 40% (95% CI 37.9 - 42.3), 60% (95% CI 55.7 - 65.9) and 70% (CI 95% 67.1 - 76.7), respectively. The inhibition of the emergence of imagos was significant (p<0.05) 50% (95% CI 42.3 - 57.8) in all concentrations equal to or greater than 200 mg/mL. Finally, 20% (95% CI 12.6 - 29.3) of the emerging imagos at 460 mg/mL presented morphoananomic alterations (p<0.05). The LC50 and LC90 estimated (larval phase) were 22.36 mg/mL (95%CI 15.06-33.19) and 245.08 mg/mL (95%CI 165.10-363.82), respectively. Conclusions: The methanolic extract of M. citrifolia was effective as larvicide, altering the pupation and the emergence of imagos of D. hominis. In addition, it modified the imagos morphoanatomy; interesting results to promote in-situ and other bioguided fractionation studies of this extract in different D. hominis stages; being M. citrifolia a plant species widely adapted to the conditions of the Meta department, Colombia.

Resumen Antecedentes: Dermatobiosis cutánea bovina o miasis furuncular causada por Dermatobia hominis, es una parasitosis que afecta principalmente bovinos de los trópicos y representa interés particular en salud pública como zoonosis. Su control se sustenta en el uso de ivermectinas, las cuales tienen prolongados tiempos de retiro, afectando la dinámica productiva dentro de los hatos bovinos lecheros. Objetivo: Evaluar el efecto in-vitro del extracto metanólico del fruto maduro de Morinda citrifolia en el ciclo de vida de D. hominis. Métodos: Se tomaron larvas de D. hominis directamente de pieles de bovinos parasitados naturalmente. Estas larvas fueron expuestas por inmersión a diferentes concentraciones del extracto metanólico de M. citrifolia (10, 50, 100, 200, 300, 400, 460 mg/mL) diluido en agua destilada. Se utilizó ivermectina 1% como control positivo, y agua destilada como control negativo. Posteriormente, se evaluó la actividad larvicida en las primeras 48 horas post-inmersión (PI), pupicida dentro de los 10 a 23 días PI, inhibición en la emergencia y alteraciones anatómicas de imagos, dentro de los días 24 al 35 PI; recreando el desarrollo pupal y su eclosión en el suelo, bajo condiciones controladas de laboratorio. La obtención de CL50 y CL90 de la fase larval se realizó a través de regresión lineal por el método Probit. Resultados: Las concentraciones de M. citrofolia de 400 mg/mL y 460 mg/mL tuvieron un efecto larvicida (T1) significativo (p<0.05) del 40% (IC 95% 34.7 - 43.9) y 60% (IC 95% 56.8 - 67.3), respectivamente. El efecto pupicida (T2) de las larvas sobrevivientes fue significativo (p<0.05) en el orden del 40% (IC 95% 37.9 - 42.3), 60% (IC 95% 55.7 - 65.9) y 70% (IC 95% 67.1 - 76.7) en 300, 400 y 460 mg/mL, respectivamente. La inhibición en la emergencia de imagos fue significativa (p<0.05), 50% (IC 95% 42.3 - 57.8) en todas las concentraciones iguales o mayores a 200 mg/mL. Finalmente, el 20% (IC 95% 12.6 - 29.3) de los imagos emergentes en 460 mg/mL, presentaron alteraciones morfoanatómicas (p<0.05). Se estimaron CL50 y CL90 (fase larval) de 22.36 mg/mL (95%IC 15.06-33.19) y 245.08 mg/mL (95%IC 165.10-363.82), respectivamente. Conclusiones: El extracto metanólico de M. citrifolia fue eficaz larvicida, alterando el empupamiento y la emergencia de imagos de D. hominis. Además, modificó la morfoanatomía de los imagos; acción importante para promover otros estudios in-situ y de fraccionamiento bioguiado de este extracto en diferentes estadios de D. hominis; siendo M. citrifolia una especie vegetal ampliamente adaptada a las condiciones del departamento del Meta, Colombia.

Cribado computacional, síntesis y evaluación neuroprotectora de una pequeña molécula para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer

Abstract Background: Current treatments for Alzheimer’s disease primarily address symptoms, as no definitive therapeutic targets have been identified. Objectives: This study aims to conduct a virtual screening of small molecules and synthesize and evaluate one of the most promising candidates for Alzheimer’s therapy. Methods: Using AutoDock Vina, compounds with drug-like properties were docked against key proteins implicated in Alzheimer's pathology: β-Secretase, γ-Secretase, Pin1, and Cdk5. The molecule with the highest in silico affinity (PubChem ID: 84378305) was synthesized and evaluated experimentally. Cytotoxicity and neuroprotective effects were assessed using the MTT assay in the presence of the Aβ25-35 peptide. Results: Four candidate molecules showed strong binding affinity, ranging from -6.8 to -9.1 kcal/mol. The results showed that when SK-N-SH cells were simultaneously treated with Aß25-35 peptide (5 µM) and compound 84378305 (0,1 µM), the molecule exhibited significant neuroprotection (33%) after the 48 h of incubation. Conclusion: Findings indicate that this lead compound exhibits potential neuroprotective activity, highlighting its promise as a candidate for further development in Alzheimer’s disease treatment.

Resumen Antecedentes: Los tratamientos actuales para la enfermedad de Alzheimer se centran principalmente en los síntomas, ya que no se han identificado objetivos específicos. Objetivos: Este estudio tiene como objetivo realizar un cribado virtual de pequeñas moléculas y sintetizar y evaluar uno de los candidatos más prometedores para la terapia del Alzheimer. Métodos: Utilizando AutoDock Vina, compuestos con propiedades similares a las de los fármacos se acoplaron a proteínas clave implicadas en la patología del Alzheimer: β-Secretasa, γ-Secretasa, Pin1 y Cdk5. La molécula con la mayor afinidad in silico (PubChem ID: 84378305) se sintetizó y evaluó experimentalmente. La citotoxicidad y los efectos neuroprotectores se evaluaron utilizando el ensayo MTT en presencia del péptido Aβ25-35. Resultados: Cuatro moléculas candidatas mostraron una fuerte afinidad de unión, con puntuaciones que oscilaron entre -6,8 y -9,1 kcal/mol. Los resultados mostraron que cuando las células SK-N-SH fueron tratadas simultáneamente con el péptido Aß25-35 (5 µM) y el compuesto 84378305 (0,1 µM), la molécula exhibió una neuroprotección significativa (33%) después de las 48 h de incubación. Conclusión: Los hallazgos indican que este compuesto exhibe una actividad neuroprotectora potencial, lo que resalta su potencial como candidato para un mayor desarrollo en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.