Biomédica

Tuberculosis in patientes treated with tumor necrosis factor-alpha antagonists living in an endemic area. Is the risk worthwhile?

Tumor necrosis factor alpha antagonists (TNFA) are biological agents to treat chronic inflammatory and autoimmune diseases. However, their use is associated with an increased rate of tuberculosis, endemic mycoses, and intracellular bacterial infections. Since tuberculosis is moderately to highly endemic in Colombia, the risk of these infections in patients treated with TNFAs may be higher than previously reported in Colombia. Recently, four patients have developed tuberculosis during TNFA therapy. Tuberculosis appeared between 3 to 24 months after initiation of TFNA therapy and was independent of previous tuberculin skin test status. A review of the relevant literature and recommendations are presented as guides for surveillance and prophylaxis on a country-wide basis.

Los antagonistas del factor de necrosis tumoral alfa (infliximab, adalimumab y etanercept) son agentes biológicos utilizados en el tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas y autoinmunes. Sin embargo, su uso está asociado con el incremento de la tasa de tuberculosis, micosis endémicas e infecciones bacterianas intracelulares. Dado que la tuberculosis es moderada/altamente endémica en Colombia, el riesgo de esta infección en los pacientes tratados con estos agentes biológicos puede incrementarse y hacer dicha tasa mayor que la informada previamente (tanto en Colombia como en el mundo). Se presentan cuatro pacientes que desarrollaron tuberculosis durante el tratamiento con antagonistas del factor de necrosis tumoral alfa. La presentación de la tuberculosis ocurrió en promedio 15 meses después del inicio del agente biológico y fue independiente de la prueba de tuberculina. Se hace una revisión del tema y se plantea la necesidad de implementar guías y estrategias gubernamentales orientadas a la detección y profilaxis de tuberculosis en este grupo de pacientes.

Impact of the new definitions in the prevalence of the metabolic syndrome in an adult population at Bucaramanga, Colombia

Introducción. La prevalencia de síndrome metabólico depende de los criterios de clasificación empleados, como son los de la International Diabetes Federation y el Adult Treatment Panel o su modificación. Objetivo. Comparar la prevalencia del síndrome metabólico generada por cada una de las tres definiciones en una población de adultos. Materiales y métodos. Se estudiaron 155 personas (54,2% varones, edad promedio de 40,9 años). Se aplicaron las tres definiciones y se comparó la prevalencia con la prueba de Wilcoxon y la concordancia con kappa de Cohen. Resultados. La prevalencia de síndrome metabólico según el Adult Treatment Panel-III (ATP-III) fue 12,3% (IC95% 7,5-18,5), según el Adult Treatment Panel-IIIa (ATP-IIIa), 34,8% (IC95% 27,4-42,9) y según la International Diabetes Federation (IDF), 32,9% (IC95% 25,6-40,9). La prevalencia por ATP-III es inferior a la vista por ATP-IIIa e IDF (p<0,001), pero entre estas dos últimas es similar (p=0,083). Hay pobre concordancia entre ATP-III y ATP-IIIa (kapa=0,414, IC95% 0,409-0,420), y entre ATP-III e IDF (kapa=0,374, IC95% 0,368-0,379), pero muy buena entre ATP-IIIa e IDF (kapa=0,957, IC95% 0,950-0,963). Conclusión. Las nuevas definiciones para el síndrome metabólico (ATP-IIIa e IDF) aumentan tres veces la prevalencia del diagnóstico, sin encontrar diferencias entre ellas, a pesar de que la última organización incluye la obesidad central como un criterio necesario para el diagnóstico, cuando en la primera no se hace igual ponderación.

Introduction. The prevalence of metabolic syndrome depends on the criteria used for its classification. Three criteria in common use are those from International Diabetes Federation (IDF), the Adult Treatment Panel (ATP-III) or its update (ATP-IIIa). Objective. The prevalence statistic for generated for metabolic syndrome was compared for on the basis of each of the three criteria. Materials and methods. The sample consisted of 155 teachers and employees in the school of medicine. The average age was 40.9; 54.2% were men. The three criteria were applied and the prevalences were compared with the Wilcoxon test and Cohens kappa. Results. Metabolic syndrome prevalence generated by each criterion was as follows: ATP-III was 12.3% (95%CI 7.5-18.5), ATP-IIIa was 34.8% (95%CI 27.4-42.9) and IDF 32.9% (95%CI 25.6--40.9). The prevalence indicated by ATP-III was lower than the ATP-IIIa or IDF prevalances (p < 0,001); however those of ATPIII-a and IDF were similar (p=0,083). Poor agreement was seen between ATP-III and ATP-IIIa (k=0.414, IC95% 0.409-0.420), and between ATP-III and IDF (k=0.374, IC95% 0.368-0.379); however, very good agreement was obtained between ATP-IIIa and IDF (k=0.957, IC95% 0.950-0.963). Conclusion. The new definitions for metabolic syndrome, ATP-IIIa and IDF, increase the prevalence statistic by three times. This occurred despite the inclusion in IDF of an obesity factor in the criteria set.

Perceived urgency of medical condition and use of health care services in Medellín, Colombia, 2005-2006

Introducción. Medellín posee una población de 2093.624 habitantes, a quienes 47 instituciones de salud proveen los servicios de urgencias. La percepción de seriedad de una condición médica, además de la accesibilidad y la disponibilidad del cuidado, puede influir en el uso de los servicios de salud en la región. Objetivo. Fue estimar la incidencia de las condiciones médicas urgentes percibidas por la comunidad que generan visitas a los servicios de salud. Materiales y métodos. Se llevó a cabo un estudio transversal mediante una encuesta puerta a puerta en 1.442 hogares de 70 barrios. Resultados. De las 612.689 personas entrevistadas, 533.718 (87,11%) informaron haber presentado una urgencia médica y visitado un servicio de salud. Los problemas respiratorios fueron la principal causa de consulta reportada en 113.153 (21,20%) de las personas. De las 533.718 visitas reportadas, 501.558 (93,97%) fueron atendidas. De las 21.042 visitas no atendidas, 42,0% no fueron consideradas urgentes por el personal hospitalario. No se pudo obtener información de las visitas admitidas, 11.118 (2,08%). Conclusiones. En Medellín la incidencia de las urgencias médicas que generaron visitas a los servicios de salud es alta. La gran prevalencia de las urgencias respiratorias y otras condiciones que pueden ser tratadas por fuera de los servicios de urgencias hospitalarios, soporta la necesidad de la atención prehospitalaria en la región.

Introduction. Medellín has a population of 2.1 million and has 47 acute care hospitals that provide emergency health care services. Perceived seriousness of a medical condition in addition to accessibility and availability of care may influence the use of health care services in the region. Objectives. A broad-spectrum survey was conducted to rate the urgency of a health condition as perceived by the patient and how that patient proceeded to make use of health care services. Materials and methods. The cross sectional survey was conducted, using door-to-door personal interviews in 1,442 homes from 70 neighborhoods. Results. Of the 612,689 individuals interviewed, 533,718 (87,11%) reported that they have had a medical emergency. Respiratory difficulties" weres the most frequent reason for visiting a health care facility as reported by 113,153 (21.2%) of the participants. Of the 532,718 visits reported, 501,558 (93.97%) led to a hospital admission. Of the 21,042 visits not leading to an admission, 42.0% were considered as non-urgent by the hospital staff. Visits admissions reported were missing 11.118 (2.08%). Conclusions. In Medellín, the incidence of medical emergencies leading to a health care facility visit is high. The high prevalence of respiratory emergencies and other conditions that can be managed outside the emergency service indicates the need for a pre-hospital emergency service.

DNA microarray analysis reveals metastasis-associated genes in rat prostate cancer cell lines

Introduction. The molecular and cellular mechanisms involved in prostate cancer progression towards a hormone-independent and highly invasive, metastatic phenotype, are not well understood. Cell lines with different metastatic potential, when analyzed by microarray techniques, offer valuable tools for identifying genes associated with the metastatic phenotype. Objectives. Gene expression profiles were compared for two rat prostate cancer cell lines with differing metastatic abilities in order to better characterized molecular underpinnings of the prostate cancer metastatic process. Materials and methods. Affymetrix arrays were used to analyze gene expression of two rat prostate cancer cell lines, MAT-LyLu and G. Microarray data were analyzed using pathway and functional group analysis. A selected set of genes was subjected to real-time polymerase chain reaction for validating the microarray data. Results. Microarray data analysis revealed differential expression of genes from a number of signaling and metabolic pathways. Overexpression was detected in 48 genes and underexpression in 59 genes of the MAT-LyLu line compared to the standard G line. Genes were grouped into functional categories, including epithelial-extracellular matrix interaction, cell motility, cell proliferation, and transporters, among others. Many of these genes were not previously associated to prostate cancer metastasis. Conclusions. Many genes with altered expression associated with a metastatic prostate cancer phenotype were identified. Further validation of these genes in human prostate samples will determine their usefulness as biomarkers for early diagnosis of recurrence or metastasis of prostate cancer, as well as potential therapeutic targets for this disease.

Introducción. Los mecanismos moleculares y celulares involucrados en la progresión del cáncer de próstata hacia un fenotipo metastásico no son bien entendidos. El análisis molecular de líneas celulares con diferentes potenciales metastásicos ofrece un instrumento valioso para identificar genes asociados al fenotipo metastásico. Objetivos. Comparar los perfiles de expresión genética de dos líneas celulares de cáncer de próstata de rata con diferentes capacidades metastásicas para un mejor entendimiento del proceso metastásico. Materiales y métodos. Se utilizaron micromatrices de Affymetrix para analizar la expresión génica de dos líneas celulares de próstata de rata con diferentes propiedades metastásicas, MAT-LyLu y G. Los datos fueron analizados en el contexto de vías y grupos funcionales. Se utilizó reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real para validación de genes seleccionados. Resultados. Además de la expresión diferencial de genes en un número de vías de señalización y metabólicas, se detectó sobre-expresión de 48 genes y expresión disminuida de 59 genes en la línea MAT-LyLu comparado con la línea G. Los genes fueron agrupados en categorías funcionales, tales como interacción epitelial-matriz extracelular, motilidad celular, proliferación celular, y transportadores, entre otros. Muchos de estos genes no han sido asociados previamente a la metástasis del cáncer de próstata. Conclusiones. Se identificaron genes con expresión alterada asociados al fenotipo metastásico del cáncer de próstata. La subsiguiente validación de estos genes en tejido prostático humano pudiera revelar su utilidad como marcadores biológicos para esta enfermedad.

**Polymorphisms of the pfmdr1 gene in field samples of Plasmodium falciparum and their association with therapeutic response to antimalarial drugs and severe malaria in Colombia**

Introducción. El gen pfmdr1 de Plasmodium falciparum se describió como un gen de resistencia a diversos antipalúdicos. Sin embargo, no se han estudiado el papel de su polimorfismo en la respuesta terapéutica al tratamiento con antipalúdicos en Colombia, ni su relación con paludismo grave. Objetivos. Este trabajo determinó la asociación entre los polimorfismos Asn86Tir y Asp1246Tir del gen pfmdr1 con la respuesta terapéutica a cloroquina, amodiaquina y mefloquina, en tres municipios antioqueños, y la asociación de estos polimorfismos con paludismo grave en muestras de pacientes del municipio de Tumaco. Materiales y métodos. Los polimorfismos del gen pfmdr1 se determinaron mediante amplificación de ácidos nucleicos y análisis con enzimas de restricción. Resultados. El alelo silvestre Asn86 se encontró en 97% (137/141) de las muestras en el estudio de respuesta terapéutica a cloroquina, amodiaquina y mefloquina; no se observó ninguna asociación entre su presencia y la falla terapéutica como sí lo reportan otros autores. El alelo 1246Tir se encontró en una alta proporción en el estudio de respuesta terapéutica, tanto en las muestras del día cero como en los del día de la falla después del tratamiento con los antipalúdicos. Conclusiones. Los polimorfismos 86Tir y 1246Tir en el gen pfmdr1 no son útiles como factores de predicción de falla terapéutica o paludismo grave en los municipios estudiados. Este estudio describe por primera vez la presencia del alelo 86Tir en cuatro muestras clínicas de Suramérica

Introduction. The pfmdr1 gene of Plasmodium falciparum has been described as a gene conferring resistance to several antimalarial drugs. In particular, polymorphisms on specific codons have been associated with resistance and treatment failure with cloroquine, amodiaquine and mefloquine. However, the role of these polymorphisms in treatment response to antimalarials remains unexplored in Colombia. Furthermore, the relationship of these polymorphisms to severe malaria is unknown. Objective. This work studied the association of the Asn 86Tyr and Asp1246Tyr pfmdr1 polymorphisms with response to cloroquine, amodiaquine and mefloquine treatment in three municipalities of Antioquia, and severe malaria cases from the municipality Tumaco. Materials and methods.The polymorphisms were assessed by nucleic acid amplification followed by restriction length polymorphism analysis. Results. The wild-type codon Asn 86 was detected in 97% of the clinical samples from the treatment response study. No association was detected between this polymorphism and treatment failure to the three antimalarials administered. The 1246Tyr polymorphism was detected with a higher frequency in the samples from Antioquia 92% (130/141) than in those from Tumaco 22% (20/89). However, again, no association was found between the presence of a specific polymorphism and the presence of severe malaria in the municipality of Tumaco. Conclusions. The 86Tyr and 1246Tyr polymorphisms of the pfmdr1 gene are not useful as predictors of treatment failure or severe malaria in the municipalities studied. In addition, we report for the first time, the presence of the mutant codon 86Tyr in field samples in South America.

Body composition assessment by anthropometry and bioelectrical impedance

Introducción. La antropometría y el análisis de la impedancia bioeléctrica o bioimpedancia son métodos de campo ampliamente utilizados en nuestro medio para la evaluación de la composición corporal; a pesar de ello, se desconoce si generan resultados comparables. Objetivo. Comparar la composición corporal de adultos sanos evaluados por antropometría y bioimpedancia. Materiales y métodos. Se evaluaron 70 mujeres (entre los 22 y 56 años) y 53 hombres (entre los 24 y 54 años) por el método antropométrico: ecuaciones de Durning/Womersley y Jackson/Pollock, y por bioimpedancia: técnica pie-pie. La medición de los pliegues cutáneos se hizo con un calibrador Lange y la bioimpedancia se efectuó con una báscula Tanita TBF300. Para la comparación de los métodos se empleó la t de Student pareada, la correlación de Pearson, la diferencia de proporciones y el índice kappa. Resultados. El porcentaje de grasa promedio en los hombres fue mayor (p=0,000) por Durning/Womersley (25,2%) que por Jackson/Pollock (20,1%) y bioimpedancia (19,3%). En las mujeres, el porcentaje de grasa promedio fue mayor (p=0,000) por Durning/Womersley (36,9%) que por Jackson/Pollock (31,0%) y bioimpedancia (27,6%). Hubo una alta correlación entre los métodos (r>0,77) pero, al aplicar el mismo punto de corte para definir la obesidad, se encontró una baja concordancia entre estos (K<0,5). Conclusión. El método antropométrico, ecuación de Durning/Womersley, estimó los porcentajes de grasa más altos y la bioimpedancia, los más bajos. Se encontraron diferencias significativas entre los métodos y entre las ecuaciones antropométricas, lo cual sugiere que sus resultados no son comparables ni intercambiables.

Introduction. Anthropometry and electric impedance methods are widely used for body composition assessment. However the evidence is unclear whether the results obtained from the two methods can be compared. Objective. Two methods are compared for assessment of body composition; anthropometry and electric impedance. Materials and methods. Body composition was measured in 70 women; aged 22 to 56 and 53 men; aged 24 to 54, using anthropometry (Durning/Womersley and Jackson/Pollock skinfolds equations) and electric impedance (foot to foot electric impedance) to obtain percentage body fat. Results. The mean percentage body fat was significant higher with Durning/Womersley (25.2%) than Jackson/Pollock (20.1%) and electric impedance (19.3%) for men (p<0.001). The mean percentage body fat was significant higher with Durning/Womersley (36.9%) than Jackson/Pollock (31.0%) and electric impedance (27.6%) for women (p<0.001). Correlation coefficient was high when two methods were compared (r>0.77) however, the concordance between methods to classify obesity subjects was low (K<0.5). Conclusions. The percentages obtained from the anthropometry method were higher than the bioelectrical impedance method. A significant difference was found between methods applied in men and women, and therefore these methods are not comparable.

**Evaluation of ICT malaria immunochromatographic Binax NOW® ICT P.f/P.v test for rapid diagnosis of malaria in a Colombian endemic area**

Introducción. Una de las estrategias para disminuir la morbimortalidad por paludismo es realizar un diagnóstico temprano mediante pruebas rápidas de baja complejidad técnica, altamente sensibles y específicas, que puedan ser realizadas e interpretadas por personas de la misma comunidad, garantizando un tratamiento antipalúdico adecuado y oportuno. Objetivo. Determinar la sensibilidad y especificidad de la prueba inmunocromatográfica Binax NOW® malaria ICT P.f/P.v para el diagnóstico rápido de paludismo en Turbo, Antioquia. Materiales y métodos. Se incluyeron 171 pacientes distribuidos en dos grupos: el primero "pruebas simultáneas", 118 pacientes con síndrome febril agudo compatible con paludismo a los cuales se les aplicó ICT Pf/Pv y gota gruesa simultáneamente. El segundo "pruebas secuenciales", 53 pacientes con diagnóstico positivo por gota gruesa quienes se estudiaron para diagnóstico confirmatorio y seguimiento parasitológico los días 4 y 7 con ICT. Resultados. La sensibilidad y la especificidad de la prueba Binax NOW® malaria ICT Pf/Pv para diagnosticar infecciones por Plasmodium falciparum fueron 54,2% (IC95%: 52%-53,4%) y 93,6% (IC95%: 93,1%-94,2%), respectivamente, mientras que para Plasmodium vivax fueron 80% (IC95%: 77,9%-82,1%) y 100% (IC95%: 99,5%-100%); hubo disminución de la sensibilidad hasta 21,4% para P. falciparum y 33,3% para P. vivax con parasitemias menores de 500 parásitos/ul. En cuanto al diagnóstico confirmatorio, la prueba ICT Pf/Pv presentó una sensibilidad global de 71,6% con 20,7% de falsos positivos y 5,6% de falsos negativos. En el seguimiento, ICT mostró 36% y 34% de falsos positivos para los días 4 y 7, respectivamente. Conclusiones. La prueba Binax NOW® malaria ICT Pf/Pv como prueba diagnóstica mostró una sensibilidad muy baja para infecciones por P. falciparum y su capacidad para detectar parasitemias menores de 500 parásitos/ul es mínima. Como diagnóstico confirmatorio, la prueba ICT P.f/P.v. tiene buena sensibilidad para P. falciparum. Su uso para seguimiento de los pacientes no se recomienda.

Introduction. One of the strategies to reduce malarial morbidity and mortality is to make an early diagnosis, using simple rapid tests which are highly sensitive and specific. Furthermore, the tests must be easy to perform and understand by local people in such a way that a suitable and prompt antimalarial treatment is guaranteed. Objective. The sensitivity and specificity was determined for the immuno-chromographic malaria dipstick (ICT Pf/Pv) test for the rapid diagnosis of malaria in Turbo, Antioquia. Materials and methods. The sample consisted of 171 patients distributed into two groups: the first group was 118 patients with acute febrile syndrome compatible with malaria to which ICT Pf/Pv and thick smears were applied simultaneously; a second group was 53 patients with positive diagnosis by thick smear, with follow-up on the 4th and 7th days after beginning treatment. Results. Sensitivity and specificity of the ICT Pf/Pv test for Plasmodium falciparum infections were 54.2% (95%CI: 52.0-53.4%) and 93.6% (95%CI: 93.1-94.2%), respectively. In addition, for Plasmodium vivax the sensitivity and specificity were 80% (95%CI: 77.9-82.1%) and 100% (95%CI: 99.5-100%); there was a 21.4% loss of sensitivity for P. falciparum 21.4% and a 33% loss for P. vivax malaria with parasitaemias under 500 parasites/ul. For the confirmatory test, ICT Pf/Pv showed a global sensitivity of 71.6% with 20.7% false positive and 5.6% false negative results. During follow-up, ICT showed 36% and 34% false positive results for day 4 and 7, respectively. Conclusions. The ICT Pf/Pv test has a poor sensitivity for P. falciparum malaria and its capacity to detect parasitemias under 500 parasites/ul is minimal. As a confirmatory test, the ICT Pf/Pv has a good sensitivity for P. falciparum. Its use for patient follow-up is not recommended.

Characterization of two typhoid fever outbreaks in Apartadó, Antioquia, 2005

Introducción. La caracterización de los brotes de fiebre tifoidea es importante epidemiológicamente, debido a que esto permite la búsqueda de la fuente y el desarrollo de medidas de control. Objetivo. Describir un brote de fiebre tifoidea en el municipio de Apartadó y caracterizar fenotípica y genotípicamente los aislamientos de Salmonella Typhi relacionados con él. Materiales y métodos. Se estudiaron 44 pacientes, a 15 de ellos se les tomaron muestras para hemocultivos y a 7, muestras para coprocultivos. Los aislamientos bacterianos se estudiaron con pruebas bioquímicas y serotipificación y se determinó el perfil de susceptibilidad a antibióticos. Los aislamientos se evaluaron genotípicamente por reacción en cadena de la polimerasa para los genes hilA, invA e IS-200, y por electroforesis en campo pulsado con XbaI. Se estudiaron ocho muestras de agua asociadas al brote por reacción en cadena de la polimerasa y cultivo para la búsqueda de Salmonella. Resultados. A 15/44 pacientes se les confirmó el diagnóstico clínico de fiebre tifoidea, a 13 por hemocultivos y a 2 por coprocultivos positivos para S. Typhi. Todos los aislamientos de S. Typhi fueron sensibles a los antibióticos probados. La reacción en cadena de la polimerasa confirmó la presencia de los genes hilA y invA e IS-200 en todos los aislamientos estudiados. La electroforesis en campo pulsado agrupó 10 aislamientos en el patrón COINJPP.X01.0035, tres en el patrón COINJPPX01.0002, uno COINJPP.X01.0012 y uno COINJPPX01.0037. El estudio de aguas fue negativo para Salmonella spp. Conclusiones. La electroforesis en campo pulsado estableció la presencia de dos brotes, que inicialmente, por epidemiología y pruebas fenotípicas del patógeno, habían sido descritos como uno solo. Además, permitió diferenciar dos aislamientos de origen clonal diferente, que indicaron casos aislados. No se pudo corroborar la fuente de infección en el agua.

Introduction. The characterization of typhoid fever outbreaks is important because it is necessary to find the source of the infection and development control measures. Objective. A typhoid fever outbreak is described from Apartadó and the Salmonella Typhi isolates characterized by phenotypic and genotypic methods. Materials and methods. From 44 patients, 15 blood cultures and 7 stools cultures were recovered. Phenotypic identification of isolates was done by biochemical and serological tests, and antibiotic susceptibility was tested. Genes hilA, invA and the IS200 marker were evaluated by polymerase chain reaction; pulsed field gel electrophoresis was used for the XbaI gene. Eight water samples were examined by polymerase chain reaction and culture methods in order to isolate Salmonella spp. Results. Fifteen patients were confirmed for typhoid fever, 13 by blood cultures and two by stools cultures. All S. Typhi isolates were susceptible to the antimicrobials tested. The presence of hilA, invA and IS200 were confirmed by polymerase chain reaction in all isolates. The pulsed field gel electrophoresis method grouped 10 isolates in COINJPP.X01.0035 pattern, three in COINJPPX01.0002, one in COINJPP.X01.0012 and one in COINJPPX01.0037. Water isolates were negatives for Salmonella spp. Conclusions. Pulsed field gel electrophoresis discriminated the isolates in two outbreaks. Initially the cases were described as only one outbreak, by epidemiological criteria and phenotypic test. Additionally two isolates with different clonal origin were discriminated, indicating that they were unrelated to the other cases. It was not possible to confirm the infection source from water samples.

Cholinesterases in total blood measured with a semiquantitative technique, and plasma or erythrocyte cholinesterases measured with quantitative techniques

Introducción. Se necesita un modelo que permita convertir valores de colinesterasa obtenidos con la técnica Lovibond® (semicuantitativa para sangre total) en cifras equivalentes en las técnicas Michel, EQM® y Monotest® (cuantitativas eritrocitarias y plasmáticas). Objetivo. Examinar la relación entre Lovibond® (técnicas tintométrica de Edson y de Limperos y Ranta) y las técnicas cuantitativas. Materiales y métodos. Diseño descriptivo, transversal, prospectivo, con dos muestras representativas de poblaciones laborales de 18 a 59 años, sin exposición a plaguicidas inhibidores de colinesterasa, vinculadas al Seguro Social en el valle de Aburrá y en el cercano oriente antioqueño. Resultados. Se evaluaron 827 trabajadores. Según la técnica Lovibond® se clasificaron en cuatro categorías: 821 con valores de 75% o más de actividad colinesterásica (categorías 75%, 87,5% y 100%) y otros seis con actividad inferior a 75%. Con cada técnica cuantitativa los valores promedios de colinesterasa eritrocitaria y plasmática correspondientes a los cuatro valores de Lovibond® fueron estadísticamente diferentes entre sí. Los promedios de cada técnica cuantitativa fueron mayores a medida que creció el valor de la técnica semicuantitativa. Con Lovibond® se clasificó muy mal (61%-73%) la baja actividad enzimática eritrocitaria, pero la clasificación de la baja actividad plasmática fue absolutamente errónea (94%-96%). Conclusión. Es posible estimar en forma adecuada los valores de colinesterasa eritrocitaria o plasmática que corresponden a las técnicas de Michel y EQM® a partir de datos de la técnica Lovibond® y viceversa, pero sólo cuando la actividad colinesterásica es normal, pues Lovibond® tiene una capacidad muy deficiente para identificar como "bajos" los valores que realmente lo son según las pruebas cuantitativas.

Introduction. An equivalence model which allows comparison of blood cholinesterase values, measured by Lovibond® (semiquantitative technique), and Michel, EQM®, Monotest® (erythrocyte and plasma cholinesterases) values measured by quantitative techniques is required. Objective. The performance of Lovibond® (Edson tintometric and Limperos & Ranta techniques) were compared with quantitative techniques. Materials and methods. The experimental design was descriptive, cross-sectional, and prospective. From a working population (18-59 years) in Valle de Aburrá and Near East of Antioquia. 827 representative samples were chosen for their lack of exposure to cholinesterase-inhibiting plaguicides and affiliated to the Social Security System. Results. (1) 827 workers were classified by Lovibond® in four categories: 821 values with 75% of cholinesterase activity or greater (categories 75, 87.5 and 100%) and 6 with cholinesterase activity smaller than 75%. (2) With each quantitative method, the mean values of erythrocyte and plasmatic cholinesterase corresponding to the four values obtained with Lovibond® were statistically different to each other. (3) The mean values of each quantitative technique increased when increased the tintometric method value. (4) Lovibond® classified the low enzymatic erythrocyte activity very poorly (61-73%), but the classification of the low enzymatic plasma activity was almost completely in error (94-96%). Conclusion. The values of erythrocyte or plasma cholinesterase were adequately estimated by both the quantitative techniques of Michel and EQM® and by Lovibond, but only when the enzymatic activity is normal. Lovibond® , however, had a poor capacity to designate as "low" the values that were low according to the quantitative tests.

Production and characterization of a polyclonal antibody against rabies virus phosphoprotein

Introducción. La producción de una proteína viral recombinante facilita la aplicación de diversas metodologías bioquímicas en investigación básica de los virus con relevancia clínica. Además, la obtención de un anticuerpo policlonal dirigido contra la proteína P permite el estudio de su función y está soportado en la inexistencia de un anticuerpo comercial dirigido contra esa proteína. Objetivo. Producir y caracterizar un anticuerpo policlonal dirigido contra la proteína P recombinante del virus de la rabia expresada en Escherichia coli. Materiales y métodos. El gen P que codifica para la proteína P del virus de la rabia, fue amplificado por reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa reversa y clonado en el vector de expresión PinPointTM Xa-1 T (PROMEGA). La proteína recombinante P fue expresada en E. coli purificada por cromatografía de afinidad y usada para la producción del anticuerpo policlonal anti-P. El anticuerpo obtenido fue purificado y caracterizado por inmunocitoquímica con un sistema enzimático, inmunofluorescencia, Cell-ELISA fluorométrica y Western blotting. Resultados. La proteína recombinante se expresó eficientemente como una proteína de fusión biotinilada de aproximadamente 50 kd, que corresponde a la forma completa de la proteína P del virus de la rabia. El anticuerpo policlonal anti-P detectó con alta especificidad la proteína P en cultivos de neuronas sensoriales infectados con el virus de la rabia. Conclusión. La proteína P recombinante expresada en E. coli se constituyó en un antígeno específico para producir un anticuerpo policlonal que reconoce la proteína P nativa en células infectadas con el virus de la rabia.

Introduction. The expression of recombinant viral proteins has been a useful tool to study molecular biology and pathogenesis of virus infections. Because commercial specific antibodies to rabies virus phosphoprotein (P) are currently unavailable, these antibodies must be generated de novo in order to study the role of P protein during the infectious process. Objective. A polyclonal antibody was produced and characterized for use against the phosphoprotein (P) of rabies virus. The antibody was raised in rabbits with a recombinant viral phosphoprotein (P) produced in Escherichia coli. Materials and methods. Gene P coding for the viral phosphoprotein (P) was amplified by RT-PCR and cloned into the expression vector PinPointTM Xa-1 T. The recombinant protein P was expressed in Escherichia coli, purified by affinity chromatography and used to produce a polyclonal antibody anti-P. The antibody anti-P was purified and characterized by immunocytochemistry, immunofluorescence, fluorometric CELL-ELISA and Western blotting. Results. The recombinant viral phosphoprotein was successfully expressed as a 50 kd biotinylated fusion protein which corresponds to the whole protein P of rabies virus. The polyclonal antibody raised against this recombinant protein P was able to detect with high specificity, protein P in cultures of sensorial neurons infected with rabies virus. Conclusions. The P protein obtained from heterologous expression in Escherichia coli became a specific antigen that was used to produce a polyclonal antibody capable of detecting native P protein in rabies virus infected cells.

**Detection of Aedes albopictus (Skuse) (Diptera: Culicidae) in the city of Cali, Valle del Cauca, Colombia**

Introducción. Aedes albopictus es el segundo vector más importante del virus del dengue en el sudeste asiático después de Aedes aegypti. Su ingreso a las Américas ocurrió en 1985; los estudios realizados demuestran su potencial como vector en este continente. En Colombia, la especie se ha reportado en Leticia (Amazonas) en 1998 y en Buenaventura (Valle del Cauca) en 2001. Los últimos hallazgos indican que este insecto continúa avanzando hacia el interior del país. Objetivo. Informar sobre la presencia de A. albopictus en el municipio de Cali, Valle del Cauca, Colombia. Materiales y métodos. Desde el año 2002, semanalmente se realizan muestreos en larvitrampas de 17 estaciones del departamento. La determinación de la especie Ae. albopictus encontrada en Cali, fue realizada en la Unidad de Entomología del Laboratorio de Salud Pública Departamental, diagnóstico que fue confirmado en los Laboratorios de Entomología de la Universidad del Valle y del Instituto Nacional de Salud en Bogotá. Resultados. Durante abril a junio de 2006, se encontraron larvas de A. albopictus en seis estaciones de muestreo ubicadas entre el noroccidente y nororiente de Cali, una de ellas en el área periurbana del municipio de Yumbo. Conclusión. Es importante integrar el control de A. aegypti y A. albopictus en un solo programa. Se recomienda intensificar la vigilancia en los municipios y departamentos vecinos con el fin de limitar a tiempo el avance de la especie.

Introduction. Aedes albopictus is the second most important dengue virus vector in the Asian southeast after Aedes aegypti. Its entrance into the Americas occurred in 1985, and laboratory studies performed show its potential as a vector in this continent as well. In Colombia, this specie has been reported in Leticia (Amazonas) in 1998 and Buenaventura (Valle del Cauca) in 2001. The latest discoveries show that this mosquito continues to advance toward the countrys interior. Objective. To inform the presence of A. albopictus is documented in the city of Cali, Valle del Cauca, Colombia. Materials and Methods. Since 2002, weekly sampling has been performed using larval traps located at seventeen stations. The identification of the A. albopictus species, was carried out in the Unidad de Entomología, Laboratorio de Salud Pública Departamental. These identifications were confirmed in the Entomology Laboratory at Universidad del Valle and the National Institute of Health in Bogotá. Results. From April to June of 2006, larvae of A. albopictus were found in six sampling stations located between northwest and northeast of Cali, one of them in the suburban area of the Yumbo city. Conclusion. The control of A. aegypti and A. albopictus must be integrated into a single program. The surveillance in the cities and nearest departments must be intensified with the objective of limiting the advancement of A. albopictus.

The role of toll-like receptors in viral infections: HIV-1 as a model

Los receptores tipo toll son un componente esencial de la respuesta inmune innata y adaptativa, pues se encargan del reconocimiento de los diferentes agentes patógenos y desencadenan respuestas dirigidas a eliminarlos y a desarrollar memoria inmunológica. Durante las infecciones virales se activan diferentes receptores tipo toll que, generalmente, inducen una respuesta inmune protectora pero, también, pueden hacer parte de los mecanismos patogénicos del virus. Una de las infecciones virales en la que los receptores tipo toll participan de esta respuesta dual, es la infección por el VIH-1, en la cual varios de estos receptores se activan para desarrollar respuestas antivirales dirigidas por los interferones tipo 1; pero, la replicación y la diseminación del virus también se favorecen por las señales derivadas de la estimulación de dichos receptores, en particular, por las infecciones asociadas con microorganismos oportunistas, lo cual favorece la progresión de la infección por el VIH-1. Un entendimiento integral del comportamiento de estos receptores durante las infecciones virales, permitirá diseñar estrategias profilácticas o terapéuticas basadas en la modulación de su expresión y función, en particular, utilizando agonistas de estos receptores que sean eficaces en la lucha por el control de las infecciones virales.

The toll-like receptors are an essential component of the innate and adaptive immune response. They are responsible for the recognition of different pathogens agents and trigger responses directed at eliminating the pathogens as well as the development of immunological long-term memory. During viral infections, several different toll-like receptors are activated. These generally induce a protective immune response, but at the same time, can also be part of the pathogenic mechanisms of the viral infection. One of the viral infections in which toll-like receptors participate is the HIV-1 infection. Here, several receptors are activated to develop antiviral responses mediated by interferon type I; however virus replication and spreading dissemination are also favoured by signals derived from stimulation of the toll-like receptors. Individuals co-infected with opportunistic microorganisms are particularly affected, promoting the progression of HIV-1 infection. An integral understanding of the behavior of toll-like receptors during viral infections will allow the design of prophylactic and/or therapeutic strategies, based on the modulation of the expression and function of these receptors. Agonists of these receptors can be used effectively to control these viral infections.

Enfoque terapéutico de la bacteriemia por Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus es un patógeno importante que causa cerca de 11% a 33% de las bacteriemias hospitalarias y un porcentaje importante de las adquiridas en la comunidad, con una tasa de complicaciones cercana a 50%. En la siguiente revisión se destaca la epidemiología de la bacteriemia por S. aureus, con especial referencia a la situación de este patógeno en Colombia, la frecuencia y los mecanismos de resistencia a los medicamentos más frecuentemente usados en este contexto, y se discuten los elementos semiológicos, clínicos y de laboratorio que influyen en el enfoque diagnóstico y terapéutico de los pacientes con bacteriemia por este microorganismo.

Staphylococcus aureus is an important human pathogen, responsible for 11-33% of the bacteremias acquired in the hospital setting and nearly 50% of those acquired in the community at large. The epidemiology of S. aureus bacteremia is discussed, with an special emphasis on the situation in Colombia and the resistance mechanisms against the major drug groups used for the treatment. The clinical keys and laboratory support for the appropriate clinical approaches are presented together with the therapeutic strategies for the treatment of patients with S. aureus bacteremia.

In vitro mating of Colombian isolates of the Cryptococcus neoformans species complex

Introduction. Within the Cryptococcus neoformans species complex, two species and five serotypes are recognized: C. neoformans (var. grubii, serotype A; var. neoformans, serotype D and a hybrid, serotype AD) and C. gattii (serotypes B and C). Mating types a and alpha are designated by a single locus, with the mating type alpha being most prevalent in serotype A and D strains. Objective. To evaluate the ability of Colombian isolates of the C. neoformans species complex to mate in vitro with tester strains of the opposite mating type. Materials and methods. Fifty three clinical isolates were included in this study, 33 C. neoformans var. grubii serotype A, 4 C. neoformans var. neoformans serotype D, all mating type alpha, and 16 C. gattii, 13 serotype B (mating type a) and 3 serotype C (mating type alpha), were mixed on V8 juice agar, using a modified method, with the appropriate tester strains to determine the mating types in vitro. Results. Mating studies revealed that 9 of 33 (27.3%) serotype A isolates and 6 of 13 (46.2%) serotype B isolates were able to mate. Clamp connections and basidia with basidiospores were observed microscopically, indicating that the mating process had occurred. All mating competent serotype A strains were mating type alpha and the serotype B mating competent strains were mating type a. Conclusion. This is the first report of the determination of the mating ability of Colombian Cryptococcus neoformans isolates to mate in vitro with appropriate tester strains, which is of great importance to study the propagation of the fungus around the globe.

Introducción. En el complejo Cryptococcus neoformans se reconocen dos especies y cinco serotipos: C. neoformans (var. grubii, serotipo A; var. neoformans, serotipo D y un híbrido, serotipo AD) y C. gattii (serotipos B y C). La pareja sexual a y alfa es controlada por un solo locus, y la pareja sexual alfa es la más prevalente en los serotipos A y D, y es convencionalmente determinada mediante reacción en cadena de la polimerasa. Objetivo. Evaluar la habilidad de aislamientos colombianos de C. neoformans para aparearse in vitro con aislamientos control de la pareja sexual opuesta. Materiales y métodos. Treinta y tres aislamientos clínicos de C. neoformans var. grubii serotipo A, 4 de la var. neoformans serotipo D, todos pareja sexual alfa, y 16 aislamientos clínicos de C. gattii, 13 serotipo B (pareja sexual a) y 3 serotipo C (pareja sexual alfa ), se mezclaron, en agar jugo V8 modificado, con cepas control para determinar la pareja sexual in vitro. Resultados. Los estudios de apareamiento mostraron que 9 de 33 (27,3%) aislamientos serotipo A y 6 de 13 (46,2%) aislamientos serotipo B tuvieron la capacidad de aparearse con las cepas control. Todos los aislamientos del serotipo A que presentaron apareamiento eran pareja sexual alfa y los del serotipo B eran pareja sexual a. Microscópicamente se observaron conexiones en gancho, basidias y basidiosporas, estructuras que establecieron que se había realizado el proceso de apareamiento. Conclusión. Este acercamiento provee por primera vez la capacidad de que los aislamientos colombianos de C. neoformans se apareen in vitro con cepas control lo cual tiene importancia en el estudio de la diseminación del hongo.