Scielo RSS http://www.scielo.org.co/rss.php?pid=0123-939220220003&lang=pt vol. 26 num. 3 lang. pt http://www.scielo.org.co/img/en/fbpelogp.gif http://www.scielo.org.co http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0123-93922022000300197&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0123-93922022000300199&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Abstract Aim: Different species of the genus Vibrio are pathogenic for humans, the aim of this study was to standardize a multiplex PCR to identify four Vibrio species. Methods. 126 isolates environmental and 66 from the surveillance program INS were analyzed by PCR species-specific genes. Results. Of the total isolates, 124 were PCR positive for one of the species-specific genes. The PCR achieved the identification of the four target species (V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. vulnificus and V. fluvialis), showing specificity and sensitivity between 1-2 ng/ul. Discussion. A multiplex PCR was developed that could provide reliable identification of four Vibrio species.<hr/>Resumen Objetivo: diferentes especies del género Vibrio son patógenas para los humanos, el objetivo de este estudio fue estandarizar una PCR múltiple para identificar cuatro especies de Vibrio. Metodología: 126 aislamientos ambientales y 66 aislamientos recuperados del programa de vigilancia fueron analizados mediante amplificación por PCR de genes especie específicos. Resultados: del total de aislamientos, 124 fueron positivos por PCR para uno de los genes especie-específicos. La PCR logró la identificación de las cuatro especies blanco (V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. vulnificus y V. fluvialis), mostrando especificidad y sensibilidad entre 1-2 ng/ul. Discusión: se desarrolló una PCR múltiple que provee una identificación confiable de las cuatro especies de Vibrio.