Caracterización de polimorfismos en el gen pfmdr1 en aislados clínicos de p. Falciparum en Colombia

 

 

Paula Montoya¹; Silvia Blair ²; Jaime Carmona ³; Amanda Maestre³

Grupo Malaria, Universidad de Antioquia.

1 Estudiante de maestría. Corporación Ciencias Básicas Biomédicas.

2 Coordinadora Grupo Malaria. Universidad de Antioquia

3 Profesor- investigador. Universidad de Antioquia paulamelon@hotmail.com

 

 

---

INTRODUCCIÓN

La malaria es uno de los principales problemas de salud pública a nivel mundial. Dos de los principales obstáculos en el control y tratamiento, son el alto nivel de falla terapéutica y la rápida diseminación de parásitos resistentes a antimaláricos (1). La resistencia en P. falciparum ha sido definida como un fenómeno multigénico. El gen Pfmdr1 codifica una Pglicoproteína transmembranal (Pgh1) en la vacuola digestiva del parásito que ha sido relacionada con el transporte de medicamentos como cloroquina (CQ), mefloquina (MQ), halofantrina (HF) y artemisina( ART ) (2). La presencia de polimorfismos y más de una copia del gen Pfmdr1 ha sido asociado con resistencia a estos mismos antimaláricos. La mutación Asn-86-Try en este gen, se ha relacionado con resistencia a CQ y con sensibilidad a MQ, HF y ART, mientras que la presencia del codón silvestre Asp-1246 se ha relacionado con resistencia a estos últimos antimaláricos (2).

OBJETIVO GENERAL

Caracterizar polimorfismos en el gen Pfmdr-1 en los codones 86 y 1246 de muestras clínicas de P. falciparum de tres regiones colombianas con diferente nivel de endemicidad y determinar su relación con la respuesta terapéutica a los antimaláricos de primera línea.

METODOLOGÍA

Población de estudio: 97 muestras clínicas de P.falciparum del municipio de Turbo con evaluación de respuesta terapéutica AQ/S-P y MQ y 88 muestras de Tumaco sin respuesta terapéutica.

Análisis del gen Pfmdr1 mediante PCR-RFLP: el ADN se extrae de papel de filtro por el método de Chelex y mediante PCR anidada se amplifican las regiones nucleotídicas 754 y 4234 del gen Pfmdr1 donde se encuentran los codones 86 y 1246, los fragmentos obtenidos de 291pb y 203pb se digieren con las enzimas Bgl-II y Afl-III para identificar la mutación Asn-86-Try y Asp-1246-Tyr respectivamente según protocolo de Djimdé et al 2001 (3).

RESULTADOS PRELIMINARES

En los resultados parciales se ha encontrado el codón mutado 1246-Try en el 72% de las muestras Turbo y en el 21% de las muestras de Tumaco. (Ver Figura).

 

CONCLUSIONES

Los resultados preliminares sugieren que la mutación 1246- Try se encuentra ampliamente distribuida en las regiones de Turbo y Tumaco, endémicas para malaria por P. falciparum y que podría ser uno de los factores involucrados en resistencia a antimaláricos en estas regiones.

 

PALABRAS CLAVE

P. FALCIPARUM, PFMDR-1, RESISTENCIA, MALARIA, COLOMBIA

 

 

BIBLIOGRAFÍA

1. WONGSRICHANALAI C, PICKARD AL, WERNSDORFER WH, MESHNICK SR. Epidemiology of drug-resistant malaria. Lancet Infect Dis, 2002; 2: 209-218.

2. REED MB, SALIBA KJ, CARUANA SR, KIRK K, COWMAN AF. Pgh1 modulates sensitivity and resistance to multiple antimalarials in Plasmodium falciparum. Nature, 2000; 403: 906-909.

3. DJIMDÉ A, DOUMBO OK, CORTESE JF, KAYENTAO K, DOUMBO S, DIOURTE Y, et al. A molecular marker for chloroquine-resistant falciparum malaria. N Engl J Med, 2001; 344: 257-263.