Introdução

Os triglicerídeos são um dos componentes gordurosos do sangue e sua elevação pode causar, em humanos, obesidade, doenças cardiovasculares, esteatose hepática, pancreatite, entre outros (¹). A prática de exercícios é responsável pela diminuição da gordura armazenada no organismo e dos compostos lipídicos séricos, aumentando a massa magra e a expectativa de vida do indivíduo, equilibrando a quantidade de energia ingerida e utilizada (²,³,⁴). Os substratos energéticos utilizados durante o repouso e o exercício físico são os carboidratos e os lipídeos. A contribuição de cada substrato para a manutenção da demanda de energia durante a atividade física é determinada pela intensidade e duração do esforço, treinamento, disponibilidade, estado nutricional e ação hormonal (⁵). A lipólise aumenta com o esforço físico, o qual resulta em um aumento significativo no número e na atividade das mitocôndrias do tecido muscular, resultando também em um aumento na oxidação dos ácidos graxos livres (⁶).

Além de induzir processos biológicos com efeitos positivos, o exercício físico quando ultrapassa os limites fisiológicos pode levar a produção de radicais livres ou espécies reativas de oxigênio (EROs), os quais geram consequências prejudiciais ao organismo (⁷). De acordo com Moffarts et al. (⁸), uma das principais ações deletérias dos EROs é a lesão tecidual, tais como a oxidação das membranas lipídicas. Esse estresse oxidativo contribui para acelerar o processo de fadiga e lesão na fibra muscular, gerando intolerância ao exercício e diminuição de desempenho atlético. Cavalos submetidos a altas velocidades podem desenvolver níveis elevados de estresse metabólico dependendo da intensidade e duração do esforço muscular. A adenosina trifosfato e fosfato de creatina, rapidamente são consumidos levando a produção de energia por vias glicolíticas e/ou oxidativas (⁹). Buscar o melhor desempenho e bem-estar dos animais durante as competições de resistência é essencial para promover e manter agradável o esporte eqüestre que muito se desenvolve em toda parte do mundo (¹⁰).

Para prevenir o surgimento do estresse oxidativo proveniente do exercício, sugere-se a utilização de suplementação dietética com substancias antioxidante, tendo como objetivo neutralizar a produção dos EROs (¹¹). O principal antioxidante biológico associado ao estresse oxidativo é a vitamina “E”, também conhecida como sua forma ativa alfa-tocoferol (¹²). É encontrada em todas as membranas celulares, porém sua maior quantidade está na membrana mitocondrial interna onde se localiza o sistema de transporte de elétrons (¹³). Esta possui homólogos que realizam muitas atividades biológicas, e é um antioxidante lipossolúvel no organismo (¹⁴). Na sua estrutura há uma cadeia lateral hidrofóbica que protege as membranas celulares contra o dano oxidativo (¹⁵). Sua função é prevenir a peroxidação lipídica fazendo a captura de radicais peroxila, além de agir na prevenção da oxidação de compostos lipídicos, e também é essencial para o funcionamento adequado das membranas celulares (¹⁶). Os lipídios quando oxidados, não são metabolizados normalmente, acumulando-se e gerando patologias no sistema cardiovascular (¹⁷).

O exercício físico induz uma maior captura de triglicerídeos e colesterol ao diminuir a concentração da enzima triacilglicerol lipase hepática, cuja função é hidrolisar estes compostos quando conjugados numa sub-fração da HDL (lipoproteína de alta densidade), a HDL₂, que ao ser liberada para o fígado, torna-se mais densa e transforma-se em HDL₃ (¹⁸). Dessa maneira, com uma maior permanência da HDL₂ na circulação sanguínea, a captura dos triglicerídeos é constantemente realizada, diminuindo assim sua concentração sérica (¹⁹). Para efetuar essas funções, a HDL necessita do seu conteúdo antioxidante, a qual faz parte o alfa-tocoferol (²⁰). Considerando esta hipótese, a vitamina “E” poderia reduzir o acúmulo de triglicerídeos no sangue, o que beneficiaria a saúde do animal.

Este estudo foi realizado com o objetivo de testar a hipótese que a prática de exercício de longa duração em esteira e a suplementação com vitamina “E”, diminuem as concentrações séricas de triglicerídeos em equinos.

Materiales e métodos

O trabalho foi realizado sob a aprovação do comitê de ética com o protocolo n°128/2009 CEUA/ UNESP - Botucatu.

Utilizou-se 10 equinos inteiros e machos, sendo cinco da raça Puro Sangue Árabe e cinco da raça Crioula, mantidos em piquetes do Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ) da Universidade Estadual Paulista (Unesp), Campus de Botucatu, sob as mesmas condições de manejo alimentar e sanitário. Os animais estavam sem treinamento físico por mais de um ano, com idade variando de oito a dez anos, e peso médio de 372,1 ± 32,9 kg, foram considerados hígidos mediante exame hematológico e bioquímico sérico.

Os equinos foram submetidos a um teste padrão de exercício progressivo em esteira de alta velocidade (Mustang 2200 AG, Kagra, Suíça) inclinada a 6%, da qual a velocidade é elevada gradualmente, com o protocolo de exercício proposto por Watanabe et al. (²¹). Utilizou-se a máscara de análise de trocas gasosas e dados ventilatórios (Metavet, Cortex, Alemanha), para se extrair a carga de trabalho para cada equino, com base no consumo máximo de oxigênio (VO_2máx) (²¹), sendo o valor médio dos animais de 110,4 ± 20,4 mL/kg/min, sempre às nove horas da manhã.

Após 14 dias do teste progressivo, os equinos foram submetidos ao teste de baixa intensidade e longa duração (TLD1). O teste, considerado de exercício predominantemente aeróbico (concentração de lactato inferior a 4mmol/L), foi realizado com a esteira inclinada a 6%, à velocidade de 35% do VO_2máx de cada animal pelo período de 60 min (²²), correspondendo a uma velocidade média de 2,3 ± 0,5 m/s.

A suplementação da vitamina E (dl-alfa-tocoferol) dos animais teve início logo após o teste TLD1, na dose de 1.000 UI/animal (²³), por meio de cápsulas gelatinosas (E-tabs 1000 UI, Sigma Pharma, Hortolândia, Brasil) misturadas a raspas de rapadura, por via oral, diariamente e sem interrupção até o final do experimento. Após 59 dias do início da suplementação, os equinos realizaram o segundo teste (TLD2) com o mesmo protocolo de TLD1. A temperatura e a umidade relativa do ar do salão do Centro de Medicina Esportiva Equina da Unesp de Botucatu, onde os testes foram realizados, variou de 17,0 a 20,6ºC e 66 a 81%, respectivamente.

As coletas de sangue foram realizadas antes do teste (M0), imediatamente após o exercício (PE) e nos tempos 6h, 12h, 48h, 72h e 96h subsequentes, sendo armazenadas em tubos contendo ativador da coagulação para obtenção de soro e foram imediatamente separados e congelados a -80ºC até serem processadas.

Foi então, realizado a dosagem dos triglicerídeos séricos por meio de kit comercial (Bioclin, teste enzimático) em analisador bioquímico semi-automático, da marca Mindray, modelo BA-88A, no laboratório de patologia clinica localizado no campus Boa Vista da Universidade Vila Velha.

Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias de cada característica comparadas pelo teste de Tukey em 5% de probabilidade, sendo utilizado o programa Genes.

Resultados e discussões

Na primeira fase do experimento, sem suplementação com o antioxidante, o valor médio de triglicerídeos dos equinos antes de serem submetidos ao exercício em esteira (M0) encontra-se dentro do intervalo de normalidade (5,3 a 54,0 mg/dL) (²⁴). Já os equinos suplementados apresentaram um valor basal discretamente acima do valor máximo considerado normal e significativamente maior do que os animais não suplementados, devido a vitamina E ser lipossolúvel.

Notou-se que em TDL1, no momento PE, a concentração sérica de triglicerídeos teve um aumento significativo (p<0,05) (Tabela 1). No estudo de Orozco et al. (²⁵), cujos animais foram submetidos a treinamento a campo e testes em esteira, sendo realizado coletas de sangue antes e após o exercício, obteve-se o mesmo comportamento imediatamente após o esforço físico. O mesmo foi observado no estudo de Coelho et al. (²⁶), no qual os cavalos realizaram marcha cadenciada a campo durante quarenta minutos e no de Brunner et al. (²⁷) que acompanharam animais que foram submetidos a exercício extenuante. Mesmo com estes resultados, o aumento nas concentrações de triglicerídeos não ultrapassou o valor normal considerado para a espécie (²⁴). Este aumento de triglicérides imediatamente após a atividade ocorre devido a um bloqueio na ação da insulina e ao efeito hiperglicemiante gerado pelas catecolaminas e cortisol circulantes, gerando um balanço energético negativo, havendo lipólise e mobilização de outras fontes energéticas (²⁸), para que ocorra uma produção de energia eficiente, levando a manutenção adequada dos esforços musculares (²⁹).

Ainda nesta primeira fase, após 6 horas da realização da atividade, obteve-se a menor média, provavelmente devido a diminuição da concentração sérica de vitamina E, sendo considerado diferente significativamente de todos os outros momentos dosados, mas permanecendo dentro do intervalo de normalidade (²⁴). Observou-se uma elevação progressiva nos valores de triglicerídeos a partir do momento 12h até 96h, sendo este último a maior média encontrada. Hyyppä (³⁰) cita que nas horas pós-exercício, a normalização das concentrações de lipídeos é lenta, decorrente ao retorno da liberação de insulina na circulação sanguínea, levando a inibição da lipólise, o que pode explicar os níveis elevados de triglicerídeos após 24 horas até o momento 96h depois da realização do teste.

Com a suplementação da vitamina “E” (TLD2) a concentração de triglicérides obteve o mesmo comportamento que TDL1. Houve um aumento significativo (p<0,05) no momento PE no qual atingiu o valor máximo e ultrapassou ao intervalo de normalidade, citado por Robinson (²⁴). Em seguida houve diminuição dos valores nos momentos 6h e 12h, e a partir de 24h elevou-se gradativamente nos momentos subsequentes até atingir um valor próximo ao inicial (figura 1).

De acordo com os resultados analisados, podemos considerar que a resposta do organismo dos animais com ou sem a suplementação, apresentou comportamento semelhantes, visto que em ambos os casos: a resposta no momento PE é maior que o M0, tendo uma diminuição no momento subsequente, com um período de manutenção de valores e retornando aos níveis iniciais. Todos os momentos dosados em TDL2 obtiveram valores de triglicerídeos maiores que TDL1, porém pode-se sugerir que neste protocolo de exercício a ação da vitamina nos triglicerídeos ocorreu apenas até 6 horas, pois a partir deste momento não observou-se diferença estatística entre TDL1 e TDL2.

Outros estudos também não encontraram resultados positivos para o uso da vitamina, como o de Meagher et al. (³¹), que analisaram o efeito da vitamina “E” na peroxidação lipídica em seres humanos saudáveis. Realizaram a suplementação durante oito semanas em 30 indivíduos separados em seis grupos de cinco, sendo o primeiro placebo e os subsequentes consumindo 200, 400, 800, 1200 e 2000 UI/d da vitamina. Os grupos suplementados não obtiveram diferença do grupo placebo, sem apresentar efeito adicional do antioxidante na cadeia de peroxidação lipídica, questionando assim o efeito da vitamina “E” na diminuição dos triglicerídeos. Já Williams et al. (¹²) utilizaram cavalos que praticam enduro para avaliar a ação da vitamina “E” na peroxidação lipídica e no estresse oxidativo, e verificou que a suplementação não obteve benefícios significativos.

Fonte: self made

Figura 1 Médias de triglicerídeos sérico em equinos submetidos a exercício físico de longa duração em esteira, sem suplementação com vitamina “E” (TLD1) e com vitamina “E” (TLD2) 

Conclusões

Após a prática do exercício de longa duração em esteira, a concentração sérica de triglicerídeos não apresentou efeito significativo de redução. A vitamina “E” não atua na redução da concentração sérica de triglicerídeos após a prática do exercício de longa duração em esteira.