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Introducción
El virus de la diarrea viral bovina (vDVB) hace parte del género Pestivirus y de la familia Flaviviridae, y es causal de infecciones agudas y persistentes en el ganado (1). El vDVB tiene dos biotipos que se relacionan con la afección que estos generan sobre los cultivos celulares, el citopatogénico (CP) y el no citopatogénico (NCP), donde los animales se ven infectados más comúnmente por biotipos NCP, que causan infecciones agudas y pueden atravesar la placenta de la madre para infectar al feto (2).
Uno de los principios de mayor importancia en la infección fetal es el nacimiento de terneros persistentemente infectados (PI) con el biotipo NCP del vDVB, en donde este es capaz de generar la infección persistente en el feto, cuando la madre se infecta al inicio de la gestación (3, 4). En otras palabras, esto sucede antes de la madurez del sistema inmune adaptativo (antes del día 125 de gestación), por lo que el virus no es reconocido como un agente infeccioso o foráneo (3, 4).
A causa de esta inmunocompetencia, la infección fetal es particularmente relevante, ya que pueden producirse alteraciones congénitas o nacimiento de terneros normales que tienen anticuerpos contra el vDVB (5). Entre los síndromes clínicos en el ganado bovino, se incluyen la diarrea, las enfermedades de las mucosas y las disfunciones de la reproducción (aborto, teratogénesis, reabsorción de embriones, momificación fetal y muerte fetal) (6).
El vDVB se ha establecido como uno de los patógenos infectocontagiosos más importantes que hay en la especialidad, pues tiene alta morbilidad y baja tasa de decesos, con distribución alrededor del mundo; sin embargo, el nivel de prevalencia es diferente entre regiones y países, por lo que la seroprevalencia en los países en donde se ha estudiado, varía entre 50 y 90 % (7). Asimismo, la DVB es una de las enfermedades con implicaciones económicas y de salud más significativas para rebaños positivos (8).
Una de las características de mayor importancia de este virus es su elevada frecuencia de mutación, y la tendencia a la recombinación. Esto ha generado que tenga una gran diversidad genética y antigénica que se ve reflejada en las múltiples manifestaciones clínicas observadas en los animales afectados y en el difícil control de la enfermedad (2, 9). Por consiguiente, el control del vDVB requiere combinar la vacunación con la eliminación de animales PI, mediante exámenes serológicos y buenas prácticas de bioseguridad (2, 9).
Se ha reportado que el manejo del hato, el diseño del programa de control que incluye la población de prueba, la frecuencia de la prueba, el tamaño de la muestra, la validez de la prueba y su rendimiento, se asocian a la detección tardía del virus (10). En consecuencia, el desarrollo de estudios seroepidemiológicos basados en la prevalencia, es de gran importancia para la toma de decisiones relacionadas con la sanidad (11). Sumado a esto, en las poblaciones en las que el vDVB es endémico, factores demográficos como el tamaño y la densidad del rebaño son predictores significativos de la prevalencia de la infección (12). En ese contexto, el objetivo de este trabajo fue determinar la presencia de anticuerpos contra el vDVB en animales del municipio de Tuta, Boyacá.
Materiales y métodos
Ubicación geográfica
El estudio se adelantó en el municipio de Tuta (Boyacá, Colombia), el cual se encuentra situado a 2600 msnm, y cuenta con una temperatura media de 14ºC y precipitación anual de 935 mm. El área municipal tiene 165 km2, de modo que es prácticamente un área rural en la cual se desarrollan actividades agrícolas y ganaderas; estas últimas actividades son de las más importantes en la economía de los medianos y pequeños productores del municipio (13).
Tamaño de la muestra
El tamaño de muestra se calculó mediante la ecuación descrita por Pourhoseingholi y sus colaboradores (2013) (14). Para ello, se tuvo en cuenta el inventario total de bovinos (n = 15.837) del municipio (15), así: n = (z2p[1-P])/d2, donde n = tamaño de la muestra; Z = 1,96 a un nivel de confianza del 95 %; d = 5 %, margen de error admitido; y P = 50 % (prevalencia esperada), dado que se desconoce la seroprevalencia de DVB en bovinos de la zona. La muestra calculada fue de 374 animales.
Toma y procesamiento de las muestras
A partir de un total de 1908 hatos en el municipio, se seleccionaron aquellos que tuvieran mínimo un total de 35 animales en producción. Las muestras fueron recolectadas aleatoriamente en los diferentes hatos que cumplían con este criterio de selección, tomando un mínimo de 10 hembras bovinas en producción láctea de diferentes grupos etarios por cada hato. Teniendo como base las encuestas epidemiológicas realizadas directamente a los propietarios y a los médicos veterinarios, se recolectó la información que permitió establecer las variables a evaluar, con el fin de determinar posibles factores de riesgo relacionados con la presencia de la patología. Cabe señalar que los grupos raciales incluidos en el estudio fueron Holstein, Jersey, Normando, además de los cruces presentes en la zona.
Las muestras de sangre (5 ml aproximadamente) fueron obtenidas por punción de la vena coccígea, y se depositaron en tubos tipo vacutainer sin anticoagulante. Las muestras fueron transportadas bajo refrigeración al Laboratorio de Parasitología Veterinaria de la Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia. Dichas muestras se centrifugaron a 2500 rpm durante 10 min, y el suero resultante fue transferido a un tubo eppendorf, y almacenado posteriormente a -20 °C. La detección serológica se realizó mediante el ensayo inmunoenzimático ELISA indirecto para la detección de anticuerpos específicos contra el vDVB (9), utilizando el kit comercial Serelisa® BVD p80 Ab Mono Blocking (sensibilidad 98 % y especificidad 100 %), siguiendo el protocolo del fabricante. Se establecieron como individuos positivos aquellos en los que el porcentaje de competencia de la prueba fue ≥ 50 %, y como negativos aquellos bovinos en los que ese valor fue < 30 %.1
Análisis estadístico
El estudio fue descriptivo de corte transversal con muestreo aleatorio simple. Los resultados fueron procesados con el programa estadístico EpiInfo®. Se determinaron los factores determinantes, calculando la Razón de Prevalencia (RP). La variable dependiente (Y) incluyó los resultados serológicos obtenidos, y las variables independientes (X) fueron todos los factores determinantes establecidos en la encuesta epidemiológica. Una vez establecidos estos factores, se construyó un modelo final, utilizando análisis de regresión logística.
Consideraciones éticas
El estudio se realizó de acuerdo con la Resolución 8430 del Ministerio de Salud y Protección Social de Colombia, y la Ley 84 de 1989. Estas establecen las normas que son idóneas para el bienestar de los animales durante la investigación. Asimismo, antes de la toma de las muestras de sangre, se obtuvo la firma de consentimiento informado por parte de los propietarios de los bovinos.
Resultados
La seroprevalencia aparente (PA) de anticuerpos contra vDVB fue de 42,5 % (159/374), y la seroprevalencia real (PR), de 41,7 %, con un valor predictivo positivo (VP+) de 100 %, y un valor predictivo negativo (VP-) de 98,5 %. Para los grupos raciales evaluados, se observó que los cruces raciales presentes en la zona presentaron el valor más alto (53,8 % PA; 52,7 % PR), mientras que la raza Normando presentó la seroprevalencia más baja (39,6 % PA; 38,8 % PR) (tabla 1).
Tabla 1 PA y PR del vDVB según el grupo racial en bovinos de Tuta (Boyacá, Colombia)
| Raza | Total animales | Positivos DVB | Prevalencia aparente (%) | Prevalencia real (%) | VP+ (%) | VP- (%) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Holstein | 240 | 101 | 42,1 | 41,3 | 100 | 98,6 |
| Jersey | 17 | 8 | 47,1 | 46,2 | 100 | 98,3 |
| Normando | 91 | 36 | 39,6 | 38,8 | 100 | 98,7 |
| Cruces | 26 | 14 | 53,8 | 52,7 | 100 | 97,7 |
Fuente: elaboración propia
Los animales > 4 años presentaron la seroprevalencia más alta (54,4 % PA; 53,3 % PR), seguidos de los animales de 2 a 4 años (30,2 % PA; 29,6 % PR), los < 1 año (28,1 % PA; 27,5 % PR) y los bovinos de 1 a 2 años (26,5 % PA; 26 % PR) (tabla 2).
Tabla 2 PA y PR del vDVB por grupos etarios en bovinos de Tuta (Boyacá, Colombia)
| Edad | Total animales | Positivos DVB | Prevalencia aparente (%) | Prevalencia real (%) |
|---|---|---|---|---|
| < 1 año | 57 | 16 | 28,1 | 27,5 |
| 1 a 2 años | 68 | 18 | 26,5 | 26 |
| 2 a 4 años | 43 | 13 | 30,2 | 29,6 |
| > 4 años | 206 | 112 | 54,4 | 53,3 |
Fuente: elaboración propia
No se encontró asociación estadística significativa entre la presentación de la enfermedad y las razas evaluadas (p ≤ 0,05). Sin embargo, se estableció asociación entre los grupos etarios 1 a 2 años (p = 0,002032069), > 4 años (p = 0,0000001922) y la seropositividad del virus. Asimismo, el valor de RP permitió establecer a las hembras de 1 a 2 años como factor de protección para la enfermedad, mientras que los individuos > 4 años se identificaron como posibles factores de riesgo para la presentación de anticuerpos contra DVB (tabla 3).
Tabla 3 Análisis de la raza y edad como posibles factores de riesgo asociados a las infecciones por vDVB
| Variable | Categoría | RP | IC 95 % | p-valor |
|---|---|---|---|---|
| Raza | Holstein | 0,9793 | 0,8155-1,1760 | 0,45320812 |
| Normando | 0,9354 | 0,7696-1,1370 | 0,29782041 | |
| Cruce | 1,2639 | 0,8266-1,9324 | 0,15717869 | |
| Jersey | 1,0899 | 0,6902-1,7212 | 0,44126657 | |
| Edad | < 1 año | 2,3963 | 1,8528-3,0991 | 0,05897359 |
| 1 a 2 años | 0,7333 | 0,6148-0,8747 | 0,00203207 | |
| 2 a 4 años | 0,8011 | 0,6437-0,9970 | 0,05695183 | |
| > 4 años | 1,5784 | 1,3232-1,8828 | 0,0000001922 |
Los resultados se presentan como Razón de Prevalencia (RP) e Intervalo de Confianza (IC) del 95%.
Fuente: elaboración propia
En cuanto a las variables de manejo evaluadas, se determinó asociación estadística significativa entre el arriendo de pastos (p = 0,001341679) y la compra de animales (p = 0,002913741) con la seropositividad a vDVB. Asimismo, el valor de RP estableció la presencia del corral como factor de protección para la enfermedad, mientras que se estimó el arriendo de pastos y la compra de animales como posibles factores de riesgo para la presentación de DVB (tabla 4).
Tabla 4 Análisis de las prácticas de manejo como posibles factores de riesgo asociados a infecciones por vDVB
Los resultados se presentan como Razón de Prevalencia (RP) e Intervalo de Confianza (IC) del 95 %.
Fuente: elaboración propia
Al analizar las variables reproductivas, el toro compartido (p = 0,001398081) y el préstamo de reproductor (p = 0,001473332) presentaron asociación estadística significativa con la seropositividad de la enfermedad. El valor de la RP estableció las variables de toro compartido y préstamo de reproductor como posibles factores de riesgo para la presentación de la enfermedad (tabla 5).
Tabla 5 Análisis de las variables reproductivas como posibles factores de riesgo asociados a infecciones por vDVB
| Variable | RP | IC 95% | p-valor |
|---|---|---|---|
| Inseminación artificial (IA) | 0,8951 | 0,7366-1,0877 | 0,150638536 |
| Semen certificado | 0,9018 | 0,7437-1,0934 | 0,166899348 |
| Toro compartido | 1,674 | 1,1337-2,4717 | 0,001398081 |
| Préstamo de reproductor | 1,5774 | 1,1237-2,2143 | 0,001473332 |
Los resultados se presentan como Razón de Prevalencia (RP) e Intervalo de Confianza (IC) del 95 %.
Fuente: elaboración propia
La regresión logística permitió establecer que el grupo de animales mayores de cuatro años son el único factor de riesgo para la presentación de la enfermedad en los bovinos evaluados (tabla 6).
Tabla 6 Análisis de variables como posibles factores de riesgo asociados a las infecciones por vDVB
| Variable | Odds Ratio | LIC (95 %) | SIC (95 %) | p-valor |
|---|---|---|---|---|
| > 4 años | 3,0659 | 199 % | 4,7334 | 0,000 |
| Arriendo de pastos | 1,4416 | 0,8393 | 2,4761 | 0,185 |
| Compra de animales | 1,4686 | 0,926 | 2,3293 | 0,1024 |
| Toro compartido | 1,1449 | 0,3577 | 3,6645 | 0,8197 |
| Préstamo de reproductor | 1,7967 | 0,6523 | 4,9493 | 0,257 |
Fuente: elaboración propia
Discusión
Investigaciones realizadas en Sotaquirá y Oicatá (Boyacá), han demostrado seroprevalencias superiores (62,7 y 55,1%, respectivamente) a lo encontrado en Tuta (3, 16). Sin embargo, estas variaciones podrían obedecer a la edad de los individuos muestreados, la exposición previa de las hembras al virus, la presencia de bovinos persistentemente infectados, el número de animales en el hato, el manejo de cada producción evaluada (17) y el programa de control de agentes infecciosos, el cual varía según la población, el tamaño de la muestra, la frecuencia, la validez y el rendimiento de la prueba diagnóstica (10). Cabe señalar que el análisis de esos aspectos no se realiza con frecuencia en las explotaciones del departamento, pues prevalece la cultura del descarte, lo cual favorece la transmisión del virus, ya sea mediante la comercialización de animales PI o gestantes que portan PI (18).
A nivel nacional, la seroprevalencia encontrada en Tuta fue similar a la hallada en el departamento de Caquetá (35,5 %) (19), y también a las encontradas en los municipios de Mercaderes y Patía (Cauca), con 39,4 % y 44,3 %, respectivamente (20). No obstante, hay una variación considerable en las prevalencias a nivel nacional, oscilando desde un 27,1 % en el municipio de Sopó y en la Sabana de Bogotá, Cundinamarca (21, 22), pasando por 46 % en el departamento del Cesar (23), hasta un 76,4 %, reportado en pequeñas fincas del cordón lechero de Boyacá (24).
La seroprevalencia más alta se encontró en los cruces (53,8 %). Sin embargo, no se determinó una asociación estadística significativa con la presencia de la enfermedad; resultados que no concuerdan con lo encontrado por Doria-Ramos y sus colaboradores (2020) (25), quienes establecieron una asociación entre las razas evaluadas y la seropositividad de DVB. Sumado a esto, se debe destacar que Amelung y compañía (2018) (26) indican que tanto en las producciones de biotipo lechero como en los hatos de gran número de animales se incrementa el riesgo de infección de vDVB, a comparación de los hatos destinados a producción de carne y que presentan menor densidad animal.
Se evidenció que la seroprevalencia más alta la presentaron los animales > 4 años (53,3 %), lo cual concuerda con Nugroho et al. (2020) (27). Lo anterior se puede explicar por un mayor tiempo de exposición durante la vida de los bovinos (28). Este grupo etario tuvo una asociación estadística significativa con la presentación de anticuerpos contra vDVB, lo que concuerda con lo evaluado por Corro y sus colaboradores (2017) (29), quienes indican que la edad resultó estadísticamente significativa, y que las vacas > 3 años tuvieron 1,79 veces más posibilidades de presentar anticuerpos contra el virus que las novillas. Además, es importante mencionar que la seroprevalencia disminuye a medida que los animales son más jóvenes, a excepción del grupo etario de 1 a 2 años (26 %), el cual se consideró como factor de protección, lo que concuerda con lo reportado por Puertas en el 2016 (30).
En tanto, el grupo etario de animales > 4 años se estableció como factor de riesgo para el vDVB, lo cual no concuerda con lo encontrado por Buitrago y compañía (2018) (21), quienes establecieron a los bovinos menores de 4 meses como factor de riesgo para la enfermedad. Sin embargo, aquello se asemeja a lo encontrado por Demil y sus colaboradores (2021) (28), quienes indican que los adultos (> 2 años) son considerados factores de riesgo potenciales asociados al vDVB. Esto se puede deber a que los anticuerpos contra el virus generalmente aumentan con el paso del tiempo; por tal razón, a mayor edad del animal, hay una mayor probabilidad de estar expuesto al virus, y por ende, de ser infectado (24, 27). También, es importante resaltar que, en los hatos, la presencia de anticuerpos en los bovinos se genera por circulación y exposición viral, principalmente por contacto con animales persistentemente infectados o bovinos que poseen infección aguda (21).
En ese escenario, el arriendo de pasto y la compra de animales presentaron asociación estadística significativa con el virus. Aquello concuerda con lo encontrado en el metaanálisis realizado por Van Roon y compañía (2020) (10), quienes indican que los hatos que introdujeron ganado (OR = 1,41, IC 95 %: 1,18-1,69) y aquellos que comparten pastos o tienen contacto directo con ganado de otras producciones en pastoreo (OR = 1,32, IC del 95 %: 1,07-1,63) tienen mayores posibilidades de presentar el virus.
Las anteriores prácticas de manejo representan un riesgo para las producciones, al ingresar animales nuevos sin conocerse su estado sanitario, pues estos pueden presentar la enfermedad de forma subclínica, imposibilitando su fácil detección. Además, al transportar a los animales hacia nuevas praderas, se incrementa la probabilidad de contagio por contacto con superficies contaminadas del vehículo en el que se transportan, lo cual también pudo suceder al ser expuestos estos a patógenos que pudieron ser expulsados por los animales que estuvieron previamente allí (31, 32).
Asimismo, las variables de toro compartido y préstamo de reproductor presentaron asociación estadística significativa con la seropositividad al virus. Por su parte, Sánchez (2018) (33) afirma que la transmisión del virus por medio del reproductor es muy común, especialmente en pequeñas producciones, puesto que no se tiene certeza del buen estado de salud de estos animales. Con ello, se incrementa la posibilidad de contagio, particularmente en producciones lecheras, por el mayor porcentaje de susceptibilidad que estos animales suelen reportar. Además, Williams y Winden (2014) (34) anotaron que las producciones con un toro presente en la finca tenían probabilidades más altas de infección del vDVB.
También se ha reportado que la infección por el vDVB en los hatos vecinos es un riesgo potencial de incursión de la enfermedad, por lo que el préstamo del reproductor puede aumentar las posibilidades de infección (35). Sumado a lo anterior, es importante tener en cuenta que el virus puede transmitirse por contacto directo con secreciones nasales y a través del semen al momento de la monta natural. Es por eso que el sistema de monta abierto se considera como un importante factor de riesgo para el ingreso de la enfermedad, cuando no se tiene un protocolo biosanitario riguroso, ya que un toro puede ser PI e infectar a varias hembras, y puede generar nuevos animales con infección persistente, que perpetúen la presencia del virus dentro de la producción bovina (36, 37).
Según lo expuesto por Pecora y compañía (2017) (38), el vDVB es un patógeno inmunosupresor y condicionante a infecciones con otros agentes patógenos como Mannheimia haemolitica, virus de la Rinotraqueitis Infecciosa Bovina (IBR), entre otros; agentes que pueden desencadenar a su vez problemas reproductivos y respiratorios que generan mayores complicaciones a la salud de los animales, y que dificultan su diagnóstico preciso. Es por eso que es indispensable generar planes de prevención y control de DVB dentro de las producciones.
Conclusiones
La alta seroprevalencia encontrada en este estudio indica una problemática importante en el sector pecuario del municipio de Tuta (Boyacá-Colombia), ya que demuestra la presencia del virus en los hatos evaluados, que puede conllevar a su posible diseminación. Sin embargo, también se debe considerar que las prácticas de manejo no se establecieron como factores de riesgo asociados a la presentación de DVB, de manera que se considera importante la necesidad de intensificar las medidas preventivas que incluyan la vacunación y prácticas de manejo dirigidas al mantenimiento de la bioseguridad en las producciones, para que de esa manera se pueda reducir y en lo posible eliminar la presencia del virus en la zona.
