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Introducción
Las Pseudomonas y Aeromonas son bacilos Gram negativos, aerobios, oxidasa positivos. Tienen, gracias a su metabolismo, una cierta facilidad de adaptación que les permite adecuar el hábitat don de se encuentren para utilizar diferentes fuentes como el carbono o el nitrógeno para su nutrición 1. Poseen una cápsula de exopolisacáridos que facilita la adhesión celular, la formación de bio-películas y las protege de la fagocitosis o los io nes libres formados en la potabilización del agua, aumentando así su patogenicidad 1,2. Debido a esta adaptación al medio ambiente las Pseudomonas y Aeromonas se han convertido en un problema para la salud pública ya que estos microorganis mos son capaces de colonizar un amplio rango de nichos dentro de los cuales se encuentra el agua de piscina que, a pesar de ser tratada mediante pro cesos de desinfección, presenta estas bacterias que causan patologías de consideración en los usuarios3.
En este sentido, el objetivo de aislar e identificar Pseudomonas (incluidas en la Resolución 1618 de 2010) y Aeromonas (no incluidas en la Resolu ción), en agua de piscinas públicas de la ciudad de Bogotá busca plantear la necesidad de establecer indicadores bacterianos no habituales que puedan definir mejor la calidad del agua para uso recreacional, con el fin de demostrar que los indicadores microbiológicos utilizados tradicionalmente para evaluar los riesgos asociados al uso de las aguas de piscinas no siempre suministran una información suficiente de los riesgos reales del usuario.
Materiales y métodos
Se estudiaron ocho piscinas públicas de la ciudad de Bogotá, identificadas alfabéticamente de la A-H. En cada una se tomaron dos muestras, una en las horas de la mañana y otra en horas de la tarde. Se realizó un muestreo por mes (abril, mayo y junio) del año 2009. Para la recolección de las muestras se utilizaron frascos Schott de 250mL con Tiosulfato de Sodio al 10%. La muestra se tomó a 50cm de la superficie introduciendo el frasco en posición invertida y fueron transporta das a 4°C.
Para el procesamiento de las muestras se utilizó la técnica de filtración por membrana según los procedimientos del Standard Methods 4 y de USEPA 5. Como control se utilizaron cepas de Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 y de Aeromo nas hydrophila ATCC 1020. La identificación de algunas de las bacterias aisladas se realizó median te BBL Crystal E/NF.
Resultados
En el primer muestreo realizado en el mes de abril, el 88% y el 100% de las muestras presentaron re cuentos de Pseudomonas spp. en horas de la maña na y la tarde respectivamente. Para el mes de mayo se obtuvieron recuentos de Pseudomonas sp. en el 100% de las piscinas tanto en horas de la mañana como en la tarde. En el tercer muestreo, realizado en el mes de junio, se presentó Pseudomonas en el 100% de las piscinas tanto en horas de la mañana como en horas de la tarde. El recuento en siete de las piscinas a lo largo de los tres meses varía, mientras que en la piscina G los resultados fueron los mismos en los tres meses tanto en la mañana como en la tarde, Tabla 1. Estos resultados indican que ninguna de las piscinas cumple con lo estable cido con la Resolución 1618/10, según la cual el recuento de este microorganismo debe ser 0 UF-C/100mL.
Tabla 1 Recuentos de Pseudomonas spp. en UFC/100mL.
| Piscina | ABRIL | MAYO | JUNIO | ||||
| Mañana | Tarde | Mañana | Tarde | Mañana | Tarde | ||
| A | 100 | 100 | 5 | 35 | 10 | 30 | |
| B | 23 | 15 | 100 | 100 | 100 | 1 | |
| C | 100 | 100 | 5 | 10 | 52 | 23 | |
| D | 100 | 100 | 62 | 30 | 100 | 100 | |
| E | 100 | 100 | 7 | 5 | 100 | 100 | |
| F | 0 | 18 | 45 | 100 | 58 | 33 | |
| G | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| H | 10 | 100 | 3 | 3 | 34 | 6 | |
Como se observa en la Figura 1, durante los tres meses del estudio el recuento promedio más alto fue el de la piscina G con 100 UFC/100ml y el más bajo el de la piscina H con 26 UFC/100mL.
En la Figura 2 se observa que el recuento prome dio de Pseudomonas spp. es más bajo en la mañana durante los meses de abril y mayo, mientras que en el mes de junio es más alto en la mañana.
En relación a las Aeromonas sp., el 13% de las piscinas presentó recuentos en los muestreos de la mañana y la tarde. En el mes de abril única mente se obtuvo recuento de la piscina H tanto en la muestra de la mañana como la de la tarde; las piscinas A, B, C, D, E, F no presentaron UF-C/100mL en ninguno de los muestreos realizados en el día, Tabla 2. En el mes de mayo, la piscina G presentó un recuento en horas de la mañana ma yor que el de las horas de la tarde para Aeromonas sp. mientras que las piscinas F y H únicamente presentaron recuentos en horas de la tarde. Sin embargo, los recuentos obtenidos son bajos y en las piscinas A, B, C, D y E fue de 0 UFC/100mL para éste microorganismo (Tabla 2). El 13% de las piscinas presentaron recuentos de Aeromonas sp. en horas de la mañana y el 38% en la tarde (Tabla 2). Para el mes de junio de 2009 las piscinas C y D presentaron recuentos de Aeromonas sp. en horas de la mañana únicamente, la piscina B presentó recuento para este microorganismo únicamente en horas de la tarde, mientras que las piscinas F y H presentaron recuentos tanto en horas de la mañana como en horas de la tarde, Tabla 2.
Tabla 2 Recuentos de Aeromonas sp. en UFC/100mL.
| Piscina | ABRIL | MAYO | JUNIO | ||
| Mañana | Tarde | Mañana | Tarde | Mañana | Tarde |
| A 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| B 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 |
| C 0 | 0 | 0 | 0 | 3 | 0 |
| D 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
| E 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| F 0 | 0 | 0 | 1 | 5 | 2 |
| G 0 | 0 | 8 | 1 | 0 | 0 |
| H 15 | 10 | 0 | 7 | 3 | 6 |
Durante los tres meses del estudio, el recuento promedio más alto fue la piscina H con 6.83 UF-C/100mL y el más bajo el de las piscinas A y E con 0 UFC/100mL, Figura 3.
En la Figura 4, se observa que el recuento prome dio de Aeromonas sp. es más bajo en la mañana en mayo, mientras que en abril y junio es más alto en la mañana.
La identificación se realizó en colonias aisladas escogidas al azar por el método BBL Crystal E/ NF. Los microorganismos identificados fueron Pseudomonas aeruginosa, presente en todas las pis cinas y Stenotrophomonas maltophilia, aislada de las piscinas B y G.
En cuanto a el género de Aeromonas sp. fue iden tificado en el 63% de las piscinas, con bajos re cuentos, pero no fue posible la identificación de la especie por el difícil aislamiento que esta pre senta.
Las pruebas microbiológicas que se realizaron por la administración de las piscinas fueron: en el mes de abril coliformes fecales, en el mes de mayo co liformes fecales y totales y en junio coliformes fe cales. Según los reportes suministrados todas las piscinas cumplen con lo establecido por la legisla ción (0 UFC/100mL) 6.
Discusión
Pseudomonas aeruginosa es capaz de sobrevivir y multiplicarse en aguas tratadas 1),,debido a que necesita pequeñas cantidades de nutrientes y po see una capa polisacárida, que constituye una ba rrera fisicoquímica que protege a la bacteria de los iones de cloro libre residual 7, por eso su presencia en aguas de piscina cada vez es más fre cuente 2.
La presencia de microorganismos causantes de pa tologías en el agua de uso recreativo ha sido objeto de estudio en varios países como Venezuela donde se sugiere la inclusión de bacterias no habituales como el grupo Coliformes, especies de Pseudomonas, Streptococcus, Staphylococcus y Legionella. En España, las normas que rigen la calidad de aguas de piscinas incluyen a la Pseudomonas aeruginosa como parámetro rutinario, ya que su presencia es en cierto modo un indicador de la eficacia de la cloración, debido a que su resistencia al cloro es superior a la de los otros microorganismos pre sentes en el agua 8. Es probable que, aunque los niveles de cloro residual libre estén dentro de los parámetros exigidos por la Legislación colom biana, éstos no sean lo suficientes para eliminar totalmente microorganismos patógenos como Pseudomonas aeruginosa.
Los resultados microbiológicos aportados por la administración de las piscinas reportan que los coliformes totales y E. coli presentan recuentos de 0 UFC/100mL, lo cual puede indicar que el proceso de desinfección es adecuado para la eli minación de estos microorganismos, pero no para Pseudomonas aeruginosa, o que la presencia de esta última está inhibiendo el crecimiento de los otros indicadores, pues se ha reportado que catabolitos de Pseudomonas aeruginosa, como la piocianina, tienen un efecto bactericida sobre coliformes principalmente sobre E. coli, lo cual produciría su disminución, conduciendo a resultados erróneos en el control de calidad del agua 9.
Los indicadores que normalmente se analizan en el agua de piscinas únicamente evaluarían el pro ceso de desinfección, mientras que estudios reali zados reportan que la determinación de Pseudomonas aeruginosa y Aeromonas sp. podrían ser un indicador de riesgo para la salud del usuario 2,3,10, ya que se conoce que éstos pueden causar diferentes enfermedades en los usuarios de las pisci nas como otitis externa, conjuntivitis, dermatitis, septicemia, bacteremia, infección de heridas, o foliculitis (11 - 14). Estudios han reportado cepas de Pseudomonas aeruginosa aisladas de piscina con multiresistencia a antimicrobianos 15-17.
