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Introducción
El dengue es una enfermedad de interés en salud pública para Colombia. Entre 1990 y 2014 se registraron 1.158.429 casos, de los cuales 175.694 (15,2 %) se notificaron en la región Caribe colombiana y de éstos, aproximadamente el 33 % en el departamento del Atlántico (datos no publicados: SIVIGILA- Instituto Nacional de Salud). Soledad es el segundo municipio del departamento que notifica la mayor cantidad de casos de dengue, después del distrito de Barranquilla. Entre 1990 y 2010 se notificaron aproximadamente 5.877 (Padilla et al. 2010; Maestre-Serrano y Gómez 2013).
Para el control de esta enfermedad en los municipios del departamento del Atlántico, se han usado insecticidas orga- nosintéticos como principal medida de control sobre las poblaciones de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762); sin embargo, la aplicación sistemática y algunas veces irracional de estas moléculas ha generado resistencia en las poblaciones de esta especie, que ha sido documentada durante los últimos años (Maestre et al. 2009, 2010; Maestre-Serrano et al. 2014). Estos estudios han registrado poblaciones resistentes a insecticidas de tipo organoclorado, piretroides y en menor proporción or- ganofosforados con la expresión de mecanismos de resistencia enzimática y mutaciones de tipo kdr en el gen para del canal de sodio dependiente de voltaje (Maestre et al. 2009, 2010; Maestre-Serrano et al. 2014). Puntualmente, en el municipio de Soledad, estudios realizados entre 2008 y 2013 han registrado resistencia a los insecticidas DDT, temefos, lambdacialo- trina, deltametrina, permetrina y ciflutrina, con alta frecuencia del alelo Ile1,016 como mecanismo de resistencia (Maestre et al. 2010; Maestre-Serrano et al. 2014). Para esta población, se desconoce el estado de susceptibilidad a otros insecticidas que podrían ser utilizados como alternativa para el control del dengue ante la resistencia registrada a diferentes insecticidas.
Teniendo en cuenta lo anterior, el presente estudio tuvo como objetivo analizar el estado de la susceptibilidad a eto- fenprox y alfacipermetrina en una población de Ae. aegypti del municipio de Soledad en el departamento del Atlántico (Colombia).
Materiales y métodos
Área de estudio. El Departamento del Atlántico está situado en la región Caribe colombiana; entre los 10°15’36”-11° 06’37”N y 74042’47”-75016’34”O. Cuenta con una superficie de 3.386 km2 y está dividido en 23 municipios que incluyen su capital Barranquilla. El municipio de Soledad se encuentra ubicado en este departamento a 10°55’00”N 74°46’00”O; tiene una temperatura promedio de 28 °C y una humedad relativa entre 75 % y 85 % (Corporación Autónoma Regional del Atlántico 2002).
La población de Ae. aegypti estudiada fue recolectada en depósitos de agua tales como albercas, tanques y floreros de viviendas en los barrios La Floresta y San Antonio del municipio de Soledad. A partir del material entomológico recolectado se hizo un grupo a partir del cual se obtuvo la generación 1 (Fi) bajo condiciones controladas de laboratorio (temperatura promedio de 28 °C ± 2 °C y humedad relativa de 65 % ± 10 %). Los criterios de inclusión de los barrios seleccionados fueron: alta incidencia de infección por virus dengue, frecuente uso de insecticidas para el control del mosquito vector, altos índices aedicos y antecedentes de resistencia a insecticidas organosintéticos.
Insecticidas.
Se evaluaron dos insecticidas de tipo piretroi- de: etofenprox (pureza: 99,5 %) y alfacipermetrina (pureza: 99,5 %). A partir de las soluciones base de los insecticidas mencionados (Chem Service, West Chester, PA), se prepararon soluciones de trabajo utilizando como diluyente acetona.
Pruebas biológicas.
Se realizaron bioensayos empleando la metodología de botellas impregnadas del CDC (Centers for Disease Control and Prevention) propuesta por Brogdon y McAllister (1998). Para ello, se utilizaron botellas de vidrio marca Schott con capacidad de 250 ml, las cuales se impregnaron con las concentraciones de insecticidas evaluadas, obtenidas por dilución a partir de una concentración “stock” de los insecticidas bajo estudio. En total se evaluaron once concentraciones para etofenprox comprendidas entre 2 y 17 μg/ml y seis concentraciones de alfa cipermetrina comprendidas entre 0,4 y 2 μg/ml, las cuales generaron mortalidades entre un 2 % y un 98 %. Para cada concentración de insecticida se realizaron tres repeticiones cada una con su respectivo control, éstos últimos únicamente contenían acetona. En los casos en los que se encontró en el control mortalidad entre el 5 % y el 20 % se aplicó la fórmula por corrección de Abbott (1925) y se invalidó el bioensayo cuando la mortalidad superó el 20 % (Finney 1971).
Los bioensayos se realizaron de forma no simultanea utilizando hembras entre tres y cinco días de emergidas, sin alimentación sanguínea. En cada una de las botellas se expusieron durante una hora entre 15 y 25 hembras de la F1, registrándose los insectos caídos cada diez minutos; finalizado este tiempo de exposición, se trasladaron todos los mosquitos a vasos de recuperación libre de insecticida durante 24 horas; todos estos procedimientos se realizaron a una temperatura promedio de 28 °C ± 2 °C y una humedad relativa de 65 % ± 10 %. Transcurridas las 24 horas post-exposición se registró la mortalidad obtenida para cada concentración evaluada.
Todos los procedimientos metodológicos descritos anteriormente se realizaron además en la cepa susceptible Rockefeller, que fue empleada como grupo control.
Análisis de la información.
A partir de las concentraciones evaluadas y los porcentajes de mortalidad obtenidos para cada uno de los insecticidas, se realizó análisis de regresión log-probit, empleando el programa estadístico SPSS versión 19. Se determinó concentración “knock-down” 50 (CK50) a la hora de exposición y además se determinó concentración letal 50 (CL 50) para cada uno de los insecticidas evaluados tanto para la población de Soledad, como para la cepa susceptible Rockefeller. Para cada una de las CK50 y CL50 determinadas, se calculó los intervalos de confianza al 95 % (IC95 %) y se determinó si existía diferencia significativa entre las CK50 y CL50 para cada insecticida entre la población evaluada y la cepa susceptible, al traslapar los valores del IC calculados.
El factor de resistencia por derribo (FRCK50) se calculó a la hora de exposición para cada insecticida en la población evaluada, al dividir los valores de la CK50 de la población silvestre y la cepa susceptible; además, fue determinado el factor de resistencia a las 24 horas post exposición (FR CL5o) al dividir el resultado de la CL50 de la cepa silvestre entre la CL50 de la susceptible. En cada uno de los anteriores casos, el FR se interpretó de acuerdo al criterio propuesto por Maz- zarri y Georghiou (1995): baja resistencia (< 5X), moderada resistencia (5 -10X), alta resistencia (> 10X).
Resultados
En la tabla 1 se observan los valores de CK50 y FRck50, así como de CL50 y FRCL50 obtenidos para alfacipermetrina y eto- fenprox en la población evaluada. Se registró para etofenprox baja resistencia tanto por derribo, como a las 24 horas postexposición (FRck50 = 1,8X; FRcl50 = 2,2X); mientras que para alfacipermetrina se registró alta resistencia tanto por derribo, como a las 24 horas post-exposición (FRCK50 = 12,9X; FRCL50 = 18,9X). Se encontró diferencia significativa en los valores de CK50 y CL50, respectivamente para etofenprox y en la CL50 para alfacipermetrina entre la población de Ae. aegypti evaluada del municipio de Soledad y la cepa susceptible Rockefeller. No se encontró diferencia significativa en la CK50 para alfacipermetrina entre la población evaluada y la cepa Rockefeller.
Discusión
En Colombia, la mayoría de los estudios realizados han evaluado el estado de la susceptibilidad a los piretroides lamb- dacialotrina y deltametrina, insecticidas de mayor uso para el control de Ae. aegypti. Sin embargo, son pocos los estudios que han evaluado otras moléculas piretroides sin registro o de poco uso en salud pública para el control de poblaciones de esta especie. Para el caso del etofenprox, solo existe un estudio para los departamentos de Antioquia, Chocó y Putumayo donde se registró resistencia a dosis diagnóstico de este insecticida (OMS: 0,5 % y CDC: 6 μg/30 min) en todas las poblaciones evaluadas (Fonseca et al. 2011) y en el caso de alfacipermetrina no existen, a la fecha, estudios que hayan evaluado el estado de la susceptibilidad de las poblaciones de Ae. aegypti a este insecticida en la diferentes regiones del país.
Los resultados del presente estudio sugieren baja resistencia a etofenprox y se registra por primera vez para Colombia, alta resistencia a la alfacipermetrina. Ambos insecticidas no han sido usados para el control del vector de dengue en Colombia. Los resultados obtenidos por Fonseca et al. (2011) para etofenprox en poblaciones de Ae. aegypti en el departamento de Antioquia, Chocó y Putumayo, como los alcanzados en el presente estudio para alfacipermetrina en la población de Ae. aegypti del municipio de Soledad, estarían indicando posiblemente una resistencia cruzada con DDT o con otros piretroides como la lambdacialotrina y la deltametrina que registran alta resistencia en estas poblaciones de Ae. aegypti. En Colombia, la resistencia cruzada en piretroides también ha sido reportada a los insecticidas permetrina y ciflutrina en el departamento de Casanare en la región Orinoquía y departamentos de la región Caribe, incluida la población de Ae. aegypti del municipio de Soledad evaluada en el presente estudio (Ardila et al. 2013; Maestre-Serrano et al. 2014).
En países de la región también son pocos los estudios que han evaluado el estado de la susceptibilidad de poblaciones de Ae. aegypti a los insecticidas alfacipermetrina y etofenprox. En México, ha sido documentada resistencia a alfacipermetrina tanto por derribo, como a las 24 horas postexposición en siete poblaciones de Ae. aegypti del estado de Veracruz, sur de México (Flores et al. 2013).
El presente estudio tuvo como limitantes que no se analizaron los mecanismos responsables de la resistencia a la alfacipermetrina, como la presencia y frecuencia de mutaciones de tipo kdr y las enzimas de desintoxicación. Un estudio previo realizado con la misma población de Ae. aegypti del municipio de Soledad analizada en el presente estudio, registró resistencia al organoclorado DDT y a los piretroides lambdacialotrina, deltametrina, permetrina y ciflutrina con la expresión del alelo Ile1,016 como mecanismo de resistencia (Maestre-Serrano et al. 2014). Sin embargo, este mismo estudio indica que la mutación Ile1,016 no se correlaciona con la resistencia presentada a todos los insecticidas de tipo piretroide, lo cual ha motivado a pensar que otras mutaciones podrían estar presentes, ocasionando la resistencia que se ha reportado en la población de Ae. aegypti para este municipio del departamento del Atlántico (Maestre-Serrano et al. 2014).
En conclusión, el presente estudio reporta baja resistencia al insecticida etofenprox y alta resistencia a la alfaciperme- trina para la población de Ae. aegypti evaluada en el municipio de Soledad. Estos hallazgos, deben llevar a mantener y fortalecer en el tiempo un sistema de vigilancia que permita diseñar estrategias de prevención y manejo de la resistencia a insecticidas, para evitar su incremento y de esta forma imple- mentar acciones adecuadas para el control de las poblaciones de este insecto vector en el departamento del Atlántico.
