Abstract

RODRIGUEZ V, Paula et al. Sobrevivencia embrionaria de blastocistos murinos vitrificados en microcapilares de vidrio. Rev Colom Cienc Pecua [online]. 2010, vol.23, n.1, pp.28-34. ISSN 0120-0690.

El objetivo de este estudio fue determinar las tazas de expansión y eclosión in vitro de los blastocistos murinos vitrificados en micro-capilares de vidrio (Brand® - 5 μL). En el día 4 de preñez, los blastocistos eran colectados de las donantes, evaluados morfológicamente y localizados en tres diferentes grupos: Grupo 1 (Control): compuesto por los embriones que eran transferidos a gotas de 100 μL de medio KSOM y cultivados in vitro por un periodo de 72 h; Grupos 2 y 3: compuesto por los embriones que eran expuestos inicialmente a la solución de equilibrio (PBSm + 10% EG + 10% PROH and 0.5% PVA) por 1 min, y posteriormente a la solución de vitrificación (PBSm + 20% EG + 20% PROH + 0.5% PVA) por un periodo de 30 seg. Posteriormente, los blastocistos, eran almacenados dentro de micro-pipetas de vidrio (GMP) o micro-capilares de vidrio (GMC) y sumergidos en nitrógeno líquido (-200 °C). La dilución de los crioprotectores y desvitrificación de los embriones fue realizada al colocarlos en gotas de 500 μL de PBSm suplementado con 0.25 M de sacarosa a una temperatura de 37 °C. Después de 5 minutos los embriones fueron transferidos a gotas de 100 μL de medio KSOM y cultivados in vitro por 72 h. Las tazas de expansión de los blastocistos, posteriores al cultivo fueron de 77% (138/177) y 74% (131/175), para los blastocistos vitrificados en GMP y GMC, respectivamente. Las tazas de eclosión fueron de 91% (134/146) para el grupo control, siendo mayores que para los embriones vitrificados en GMP 61% (108/177) y GMC 53% (93/175). El número del índice de masa celular interna (ICM) para los embriones del grupo control fue de 25.7 ± 2.5 células, no teniendo diferencia significativa con el número de células observado en los embriones vitrificados en GMP (24.2±2.3) ó GMC (22.5±2.59). Además, las células del trofoectodermo, en el grupo control presentaron 63.1±3.0 células, no siendo tampoco diferentes de las células de los embriones vitrificados en GMP (58.0±1.8) ó GMC (58.0±.3.7). En conclusión, las GMC comerciales (Brand®) probadas en este estudio muestran la misma eficiencia que las GMP para la vitrificación de embriones murinos.

Keywords : blastocisto; micro-capilar; micro-pipeta de vidrio; murino; vitrificación.

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