Abstract

OSORIO CADAVID, Esteban; RAMIREZ, Mauricio; LOPEZ, William Andrés  and  MAMBUSCAY, Luz Adriana. Estandarización de un protocolo sencillo para la extracción de ADN genómico de levaduras. Rev. colomb. biotecnol [online]. 2009, vol.11, n.1, pp.125-131. ISSN 0123-3475.

Se estandarizó un protocolo rápido, sencillo y de bajo costo para la extracción de ADN genómico de levaduras a partir de lisis de la pared celular mediante tratamiento enzimático y precipitación por alcoholes. El empleo de la enzima Beta-glucoronidasa en reemplazo de la enzima Zimolasa, permitió obtener ADN en alta concentración (124,9±30,2 ng/µl) y de buena calidad (A260/A280 nm = 1,86±0,1), ideal para su uso en estudios de biología molecular. Además, se adicionó un paso de incubación del ADN obtenido a 100° C para inactivar ADNasas. La calidad del ADN obtenido fue evaluada por medio de la amplificación de la región ITS1-5.8S-ITS2, presentando bandas definidas y cuantificables (entre 380 y 880 pb) ideales para estudios de identificación molecular y filogenia.

Keywords : levadura; extracción de ADN; Beta-Glucoronidasa.

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