Abstract

PEREZ BERNAL, Maylin et al. Expresión transitoria GUS en callos de arroz (var. J-104) mediante la optimización de las condiciones de cultivo in vitro. Rev. colomb. biotecnol [online]. 2009, vol.11, n.2, pp.75-84. ISSN 0123-3475.

Se describen las condiciones óptimas para la callogénesis y cocultivo de callos con Agrobacterium tumefaciens de la variedad de arroz J-104. Se determinó el efecto de diferentes concentraciones de 2.4-D, agar y de L-prolina y L-glutamina en el medio de cultivo de callos. El uso de 2,5 mg/L de 2.4-D y 0,8% de agar permitió lograr el porcentaje más alto de callos embriogénicos. La formación de callos fue mejorada considerablemente con la adición de 500 mg/L de L-prolina e igual concentración de L-glutamina en el medio de cultivo. Se estudiaron diferentes factores en el cocultivo de los callos con A. tumefaciens: tiempo de inoculación, concentración de acetosiringona, temperatura y tiempo de cocultivo. Para comparar el efecto de cada factor sobre la expresión GUS se cuantificó la actividad transitoria mediante fluorimetría. Los valores más altos de actividad fluorimétrica fueron obtenidos con las siguientes condiciones: 10 min de inoculación, 100µM de acetosiringona en el medio de cocultivo y 3 días de cocultivo a 20 °C.

Keywords : agar; callo; cocultivo; actividad fluorimétrica GUS.

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