Resumen

ESPINEL, Esperanza  y  LOPEZ, Elizabeth. PURIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DA a-AMILASA DE PENICILLIUM COMMUNE PRODUZIDA MEDIANTE FERMENTAÇÃO EM FASE SÓLIDA. Rev.Colomb.Quim. [online]. 2009, vol.38, n.2, pp.191-208. ISSN 0120-2804.

Este estudo reporta a purificação e caracterização parcial de uma a-amilasa produzida por Penicillium commune mediante fermentação em fase sólida usando mandioca branca colombiana (Manihot esculenta Crantz) como suporte. A enzima foi purificada por precipitação fraccionada com sulfato de amónio, cromato-grafia de intercambio aniónico (DEAE-Sephadex A-50), cromatografia de filtração por gel (Sephadex G-75) e croma-tografia de intercambio catiónico (CM-Sephadex C-50) obtendo una actividade específica final de 314.82 U/mg, um grau de purificação na ordem de 62 e um rendimento de 9%. A purificação até à homogeneidade foi confirmada por SDS-PAGE. O peso molecular estimado foi de 35 kDa. A enzima mostrou máxima acti-vidade de hidrólises de amido solúvel a pH 6.0, e estabilidade num intervalo de pH de 5.0-7.0. A enzima foi estável num intervalo de temperatura de 0-50 °C, e sua temperatura óptima de reacção foi de 70°C. Íons Ca²⁺,Ba²⁺ eAg⁺ aumentaram significativamente a actividade da enzima, sendo o ião Ca²⁺, o que teve o mais alto poder indutor. Cu²⁺ não alterou significativamente a actividade da enzima, enquanto que Li⁺ eFe³⁺ a diminuíram ligeiramente (13%), e Co²⁺ eHg²⁺ a diminuíram 25% e40% respectivamente. Os valores de K_m eV_máx foram calculados usando a linearização de Lineweaver-Burk, obtendo K_m = 0.48 mg/mL e V_máx = 5.85 µmol glucosa/min. Entre os principais produtos de hidrólises do amido de mandioca encontram-se a maltosa e glucosa; este resultado proporciona evidencia de que a enzima é capaz de romper os enlaces glucosídicos a-1,4 do amido, comportamento característico de uma a-amilasa.

Palabras clave : a-amilasa; Penicillium commune; fermentação em fase sólida; mandioca branca colombiana.

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