Resumen

NIETO C, Carlos A; FORERO B, Nicolás  y  RAMIREZ H, María H. Desenho e produção de várias proteínas fusão da nicotinamida/nicotinato mononucleotido adenilil transferasa (NMNAT) do Plasmodium falciparum. Rev.Colomb.Quim. [online]. 2017, vol.46, n.3, pp.5-10. ISSN 0120-2804.  https://doi.org/10.15446/rev.colomb.quim.v46n3.63492.

As proteínas recombinantes tem convertido em ferramentas úteis na investigação bioquímica. Um problema frequente durante a sua produção é a aparição de corpos de inclusão (IB), devida principalmente à elevada expressão da proteína produzida a partir dos vectores utilizados que têm promotores de elevada eficiência; bem como características das próprias proteínas. Além disso, a nicotinamida/nicotinato mononucleótido adenililtransferasa é uma proteína central na biossíntese do NAD(H)+, molécula essencial no metabolismo celular, e tem sido estudada em protozoários parasitos. Para o estudo da NMNAT destes parasitos, foi realizada a expressão da sua versão recombinante em E. coli, e foi obtido uma grande quantidade de proteína em forma de IB. Com a finalidade de aumentar a quantidade de proteína na fração solúvel, a sequência codificadora para NMNAT de Plasmodium falciparum foi clonada em diferentes vectores de expressão, foi induzida a expressão da proteína recombinante em E. coli BL21(DE3) e foi analisada a solubilidade. A proteína fusão com maior solubilidade foi purificada e avaliada enzimáticamente. A adição da etiqueta MBP (proteína de união a maltosa) à PfNMNAT incrementou a solubilidade da proteína e permitiu obter uma proteína funcional com una alta pureza. espécie de planta.

Palabras clave : solubilidade; PfNMNAT; corpos de inclusão; TAG fusão.

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