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Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias
versão impressa ISSN 0120-0690versão On-line ISSN 2256-2958
Resumo
RODRIGUEZ V, Paula et al. Sobrevivência embrionária de blastocistos murinos vitrificados em micro capilares de vidro. Rev Colom Cienc Pecua [online]. 2010, vol.23, n.1, pp.28-34. ISSN 0120-0690.
O objectivo de este estudo foi determinar as taxas de expansão e eclosão in vitro dos blastocitos murinos vitrificados em micro capilares de vidro (Brand® - 5 μL). No quarto dia de prenhes, os blastocitos foram colectados das doadoras, avaliados morfologicamente e localizados em três diferentes grupos: Grupo 1 (Controle): composto por os embriões que foram transferidos a gotas de 100 μL de KSOM e cultivados in vitro por um período de 72 h; Grupos 2 e 3: composto por os embriões que foram expostos inicialmente á solução de equilíbrio (PBSm + 10% EG + 10% PROH e 0.5% PVA) por 1 min, e posteriormente á solução de vitrificação (PBSm + 20% EG + 20% PROH + 0.5% PVA) por um período de 30 seg. Posteriormente, os blastocistos, foram armazenados dentro de micro pipetas de vidro (GMP) ou micro capilares de vidro (GMC) e submergidos em nitrogénio líquido super-resfriado (-200°C). A diluição dos crioprotetores e desvitrificação dos embriões foi realizada ao colocar-lhos em gotas de 500 μL de PBSm suplementado com 0.25 M de sacarose a uma temperatura de 37 °C. Depois de 5 minutos, os embriões foram transferidos a gotas de 100 μL de KSOM e cultivados in vitro por 72 h. As taxas de expansão dos blastocistos, posteriores ao cultivo foram de 77% (138/177) e 74% (131/175), para os blastocistos vitrificados em GMP e GMC, respectivamente. As taxas de eclosão foram de 91% (134/146) para o grupo controle, e foram maiores os embriões vitrificados em GMP 61% (108/177) e GMC 53% (93/175). O número do índice de massa celular interna (ICM) para os embriões do grupo controle foi de 25.7 ± 2.5 células, não havendo diferencia significativa com o número de células observado em embriões vitrificados em GMP (24.2±2.3) ou GMC (22.5±2.59). Alem do mais, as células do trofoectodermo, no grupo controle apresentaram 63.1±3.0 células, no sendo diferente às células dos embriões vitrificados em GMP (58.0±1.8) ou GMC (58.0±.3.7). Em conclusão, as GMC comerciais (Brand®) provadas neste estudo indicam a mesma eficiência que as GMP para a vitrificação de embriões murinos.
Palavras-chave : blastocisto; micro capilar; micro pipeta; murino; vitrificação.