INTRODUCCIÓN

Los eventos más notorios del reinicio de la actividad ovárica (RAO) son la presentación de celos, ovulación y desarrollo del cuerpo lúteo con su secresión de progesterona (P₄) ¹. El RAO en la vaca la principal limitante en la eficiencia reproductiva y en el influyen varios factores, entre ellos, la nutrición y la condición corporal (CC) ².

Existe escasa información sobre el RAO posparto en vacas en sistemas pastoriles; por esta razón, es necesario establecer los factores que influyen en el RAO en hembras bovinas en estas condiciones de producción para darles un manejo nutricional y reproductivo que permita alcanzar la máxima eficiencia reproductiva.

En los agroecosistemas pastoriles las interacciones de entre los componentes químicos en el suelo determinan el estado de los nutrientes en el pasto y en los animales que lo aprovechan. En estas condiciones las vacas lecheras tienen déficit energético y deficiencias o excesos de macro y microelementos que afectan su fertilidad ³.

La composición química del suelo y el pasto en agroecosistemas de la región andina de Ecuador originan en las vacas lecheras excesos de proteínas y deficiencias de energía, P, Cu y Zn; consecuentemente, estas presentan alteraciones nutricionales y metabólicas, y baja CC. En estos rebaños los principales indicadores reproductivos indican prolongación del anestro posparto ^4,5 además, la CC influye en la involución uterina ⁶, lo que indica que puede influir también sobre el RAO posparto.

El objetivo de este estudio fue determinar la influencia de la condición corporal al parto (CCP) en el RAO posparto de la vaca Holstein en la región andina de Ecuador.

MATERIALES Y MÉTODOS

Escenario de la investigación. El estudio se desarrolló de noviembre de 2015 y abril de 2016 en una hacienda de la parroquia Tufiño, cantón Tulcán, provincia El Carchi; ubicada entre los 1° 12' y 43" Latitud Norte (LN) y 78 ° 33' 12" Longitud Occidental (LW), a una altura de 2 990 a 3 450 msnm.

En el área experimental las precipitaciones anuales fluctúan entre 1 000 y 1 250 mm en el período lluvioso (PLL), de octubre a abril, y de 700 a 850 mm en el período poco lluvioso (PPLL), de mayo a septiembre. Las temperaturas mínimas y máximas son 2^oC y 15°C, respectivamente, las que oscilan entre 6 y 11°C ⁷.

La zona de estudio tiene suelo del orden Andisol con 70 cm profundidad efectiva. Su relieve es ondulado con porcentaje de pendiente entre 10 y 20% ⁴.

Sistema de alimentación y manejo. Los animales se mantuvieron en pastoreo racionado, con una carga global de 2.5 UGM ha^-1. Predominaban los pastos naturalizados, Pennisetum clandestinum L. y Holcus lannatus L., y los mejorados Lolium perenne L. y sus cultivares "One fifty", Dactylus glomeratta L. y "Banquete", Trifolium repens L. y No se administró suplementación energético mineral.

Los pastos se regaban con agua de rio y se fertilizaban con urea en dosis de 200 - 300 kg de N₂/ha^-1/año^-1. Se realizaban dos ordeños diarios, de forma manual, el primero de 4 a.m. a 7 a.m. y el segundo de 3 p.m. a 6 p.m. Los terneros permanecían con sus madres hasta el tercer día de nacido, a partir del cual se se mantenían en crianza artificial.

Animales utilizados. Se seleccionaron 30 vacas Holstein entre segunda y cuarta lactancia, con edad comprendida entre 4 y 8 años, nivel productivo de 15-18 L/vaca^-1 día^-1, CCP entre 3,0 y 4,0 en la escala de 5 puntos y clínicamente sanas. Se estableció el RAO posparto y su asociación con la CCP.

Para determinar el estado general de salud se consideraron todos los eventos vinculados con el parto y el puerperio, a los que se les dio seguimiento, aplicando las invariantes funcionales del método clínico, que incluyeron reseña, anamnesis, inspección y palpación; así como, percusión y aoscultación de órganos y sistemas. Además, se valoraron las desparasitaciones y vacunaciones según cronograma del área.

Toma de muestras de sangre y determinación de progesterona (P₄). La sangre se extrajo por venopunción coccígea con tubos vacutainer, previa limpieza y desinfección del área con alcohol al 70%. Se utilizaron 10 - 50 μL de suero sanguíneo y las concentraciones de P₄ se determinaron cada siete días, desde el séptimo hasta los 120 días posparto (DPP).

La P₄ determinó por Electro quimioluminiscencia, en un analizador Cobas e 411 (Roche, Alemania), según los procedimientos del fabricante. Este método tiene elevada precisión (CV <10%), y rango de detección amplio (0-6 ng/mL).

Condición Corporal. La CCP se estimó por inspección y palpación, clasificándola en la escala de 1-5 puntos y divisiones de 0.25 entre ellos según la metodología propuesta por Rodenburg ⁸.

Actividad ovárica. El RAO posparto se estableció cuando el diámetro de los folículos dominantes (FD) fue ≥ 5 mm; éstos se estudiaron mediante ecografía hasta que se atresiaron u ovularon, o cuando las concentraciones de P₄ fueron mayores que 1 ng/mL ⁹.

La primera ovulación se estableció cuando desapareció el folículo preovulatorio y en su lugar apareció un CL ¹⁰. También cuado las concentraciones de P₄ en suero sanguíneo fueron mayores que 1 ng/mL ⁹.

El inicio de la actividad luteal se estableció cuando la concentración de P₄ en suero sanguíneo fue mayor que a 1 ng/mL durantes dos muestreos consecutivos ¹¹.

Los ciclos estrales después de la primera ovulación se consideraron normales cuando su duración fue entre 18 y 24 días o anormales (disciclia) cuando fueron ≤ a 17 o ≥ 25 días ¹².

Las vacas se clasificaron en dos categorías de acuerdo con el momento del RAO posparto, según las recomendaciones de Guáqueta et al ¹³, que para ello propone la ± DE de los días a la primera ovulación. Este evento ocurrió en las hembras en estudio a los 27.76±7.73 días, por lo que se consideraron vacas con RAO temprano, las que ovularon dentro de los primeros 35 días y con RAO tardío las que lo hicieron posteriormente.

El diámetro del FD y el volumen del CL se calcularon con ecografía dos veces por semana; se utilizó un ecógrafo CTS-800 (SIUI, China), con un transductor lineal de 5 MHz, que brinda buena relación entre la calidad de la imagen y profundidad, hasta los 11 Cm ¹⁴. El ecógrafo utilizado proporciona las medidas de estas estructuras ováricas automáticamente.

Procedimiento estadístico. Se calcularon la media ( ), desviación estándar (DE) y coeficiente de variación (CV) de cada variable del RAO. Se realizó una correlación simple entre la CCP y los principales indicadores de la RAO posparto y sus indicadores se compararon según la CCP con la prueba t-Student para muestras independientes. En estos procesamientos se utilizó el programa estadístico Statgraphics Centurion Ver. XV.II.

Se ejecutó un estudio caso control para determinar la asociación de la CCP de las vacas y el RAO posparto. Se obtuvieron las medidas de frecuencia, impacto y significación estadística con la utilización del paquete estadístico EPIDAT 3.1.

RESULTADOS

El primer FD apareció a los 16.63 días, con diámetro de 5.67±0.30 mm, que alcanzó su mayor tamaño a los 11.26 días y la ovulación ocurrió 11 días después de aparecer el FD, a los 27.76 días. El ciclo estral sucesivo a la primera ovulación tuvo una duración de 23.10±4.99 días (Tabla 1).

Tabla 1 Comportamiento de los principales indicadores del RAO posparto de vacas lecheras Holstein. 

Parámetros		DE	CV
Aparición del FD (días)	16.63	3.83	23.06
Diámetro del FD en la emergencia (mm)	5.67	0.30	5.36
Mayor diámetro del FD (mm)	11.26	0.50	4.51
Ocurrencia de la ovulación (días)	27.76	7.73	28.58
Actividad luteal (días)	34.73	9.24	26.61
Volumen del cuerpo lúteo (cm3)	7.02	2.07	29.51
Progesterona sérica (ng/mL)	3.74	1.42	38.16
Duración del ciclo estral (días)	23.10	4.99	21.61

El 46.67% de las vacas tuvieron un ciclo estral que duró entre 18 y 24 días, mientras que el 53.33% restante presentó ciclos con duración menor o superior a este rango; de ellas, el 6.67% ≤ que 17 días, el 40% entre 25 y 30 días y 6.67% mayor de 30 días (Tabla 2).

En las vacas con CCP ≥ 3.5 apareció el FD a los 15.35 días y ocurrieron las primeras ovulaciones y la actividad luteal a los 23.94 y 29.64 días, por ese orden; todos estos eventos acontecieron más temprano (p<0.05) en las que tenían una CCP<3.5 (Tabla 3).

Tabla 3 Actividad ovárica posparto ( ±EE) de vacas lecheras Holstein según la condición Corporal al Parto. 

CCP=Condición Corporal al Parto; ab letras diferentes en los superíndices dentro de cada fila, indican diferencias significativas (t-Student para muestras independientes).

En las vacas con CCP ≥3.5 el mayor diámetro del FD fue 11.42 mm, superior (p<0.05) que en las de CC<3.5 (Tabla 3). En la totalidad de las hembras con CCP≥3.5 el FD fue clase III, mientras que en las que tenían CCP<3.5 el 84.6% fue clase III y 15.4% fue clase II.

La CCP tuvo una correlación media con la aparición del FD (r = -0.3881, R²=15.06%, p=0.0341), el mayor diámetro del FD (r=0.366147; R² = 13.40%, p=0.0466), la ocurrencia de la primera ovulación (x = -0.5605; R² = 31.41%, p=0.0013) y alta con la actividad luteal (r = -0.6399, R² = 40.95%, p=0.0001), lo que indica que a mayor CCP, el tiempo en que ocurrieron esos indicadores de la actividad ovárica, expresado días, fue menor. Además, a superior CCP, mayor diámetro del FD y por tanto mayor secreción de E₂.

Igualmente, la CCP tuvo una correlación media (p=0.0026) con el VCL (r=0.5299, R²=28.08%), y de este con las concentraciones de P₄ (r=0.4331, R² = 18.76%, p = 0.0168); lo que indica que, animales con mejor CCP tienen mayor secresión de P₄ y consecuentemente, superior fertilidad posparto.

La CCP inferior a 3.5 puntos, constituyó un factor de riesgo para que las vacas tengan un RAO tardío (Tabla 4).

El Odds ratio, fue altamente significativo (p=0.0043) e indica que los animales con CCP<3.5 puntos, tienen 10.50 veces más probabilidades de tener un RAO tardío que los que tienen CCP≥de 3.5 puntos.

La Fracción atribuible en expuestos (FAE), denota el porcentaje de las vacas donde el RAO tardío es provocado por tener CCP<3.5 y la Fracción atribuible poblacional (FAP) muestra el porcentaje de ellas dentro de la población total que es causado por la CCP<de 3.5 puntos y, además, la magnitud en que pudiera reducirse el problema si las vacas tuvieran una CCP a ≥3.5 puntos.

DISCUSIÓN

El FD en esta investigación apareció más tarde que en lo reportado en vacas Holstein en Colombia, en las que se detectó a los 9.58±0.6 días en las que tuvieron RAO temprano y a los a los 10.8±1.50 días en las que el RAO fue más tardíamente ¹³. La diferencia puede estar motivada porque en el trabajo consultado los animales recibían suplementación con concentrado y sales minerales.

En este estudio cuando todos los FD alcanzan el mayor tamaño se catalogan como clase III, que son los que tienen diámetro ≥10 mm ^15,16; considerando el diámetro de los FD en la emergencia, la tasa de crecimiento folicular fue de un milímetro por día, similar al reportado en vacas Angus y Criollas en Argentina por Robson et al ¹⁷.

La primera ovulación posparto (Tabla 1) con respecto a las vacas Holstein en Colombia, ocurrió más tarde que en las que tuvieron el RAO tempranamente, pero antes que las que la reiniciaron más tardíamente, 21.55 y 48.70 días, respectivamente ¹³.

Aunque en la vaca el RAO posparto ocurre tempranamente y el primer FD se puede detectar entre 10 y 20 días después del parto; los porcentajes de ovulación son bajos y esta ocurre cerca de los 30 días posparto, lo que puede estar condicionado por la pobre concentración y baja secreción pulsátil de LH en este periodo ¹⁸.

En el posparto temprano, los folículos se desarrollan y expresan receptores para las hormonas gonadotrópicas ¹⁹; sin embargo, el primer FD posterior al parto generalmente no ovula por déficit de LH y cuando lo hace, es tras un celo silente en más del 70% de las veces y con poca fertilidad a la Inseminación Artificial ¹⁵.

Durante las primeras semanas posparto no existen limitaciones del desarrollo folicular provocadas por deficiencia de FSH, pero sí de LH, sobre todo en vacas en BEN. La deficiencia de LH impide el crecimiento, maduración y ovulación del FD de la primera cohorte ²⁰.

Los resultados obtenidos en este estudio indican que el desarrollo del FD hasta tamaño preovulatorio no es limitante en el reinicio de la reproducción posparto de las vacas Holstein, en estas condiciones de producción. Estas hembras tienen un comportamiento reproductivo más favorable que aquellas en las que el RAO posparto se produce después de los 35 DPP, las que tienen menores las tasas de preñez y, por tanto, mayores los intervalos parto concepción ²¹.

Según Adams et al ¹², el 46.67% de las vacas investigadas tuvo ciclos normales, entre 18-24 días y en el 53.33 % los ciclos fueron anormales; en el 6.67% de ellas fueron ≤ que 17 días, que lo clasifican como cortos y el resto son largos, 40% entre 25 y 30 días y 6.67% mayor de 30 días.

La duración del ciclo estral entre dos estros consecutivos ≤ a 17 días pueden deberse a que el primer FD posparto se desarrolla, pero pocas veces provoca las manifestaciones del estro. No obstante, ocurre la ovulación, se forma el CL y ocurre la luteólisis temprana por la prematura liberación de PgF₂a endometrial ¹. El 40% de los ≥ a 25 días son causa del anestro posservicio, igual que el 6.67% de los mayores a 30 días, los que también se pueden deber a mortalidad embrionaria precoz ²².

Las diferencias en los parámetros de actividad ovárica posparto (Tabla 3) pueden estar motivadas por los cambios en la CCP, y esta por las concentraciones energéticas de las vacas. Las que tienen CC<3.5 al momento del parto tendrán un BEN más pronunciado y aunque en ellas se produzca la primera ovulación posparto y subsiguientemente la formación del CL, este producirá bajos niveles de P₄¹.

El déficit de P₄ disminuye la secreción de la GnRH y la respuesta de la hipófisis a esa hormona; esto provoca ondas atípicas e insuficiente pico preovulatorio de LH que impiden el crecimiento, maduración y ovulación del FD ^20,23. Por estas razones las vacas en BEN tienen menores concentraciones circulantes de P₄ y Estrógenos (E2) ¹⁹.

Por el contrario, la vaca con CCP ≥ 3.5 puntos, tiene reservas energéticas suficientes que garantizan el desarrollo folicular posparto ya que el balance energético positivo influye favorablemente en el ovario y seguidamente el hipotálamo libera GnRH, que estimula la síntesis y liberación de FSH y LH por la hipófisis ¹⁹.

En Argentina las vacas mestizas que parieron con CC > de 2.5 puntos tuvieron mayor cantidad de FD clase tres, ≥ 10 mm de diámetro, mayores porcentajes de estas con CL y concentraciones séricas sostenidas de P₄ supriores a 0.5 ng/mL a partir de los 30 DPP. En cambio, en los animales con CC al parto ≤ 2.5 se retrasó a el RAO ¹⁶.

En esta investigación se demostró que la CCP se correlaciona con la actividad ovárica posparto; corroborando los obtenidos por Drescher et al ²⁴, quienes encontraron una correlación (p=0.0183) entre la CCP y la sumatoria de los FD clase tres en ambos ovarios.

En este estudio se demuestra que la CCP constituye un factor de riesgo significativo para el RAO tardío, corroborando que los estudios de asociación deben ser incorporados al trabajo diario porque ofrecen el impacto del factor de exposición a determinado factor de riesgo ²⁵.

La CCP y BEN posparto pueden afectar el RAO y la fisiología del eje hipotálamo-hipófisis-ovario. Consecuentemente, disminuyen la cantidad de folículos en cada onda folicular, el desarrollo del FD, la frecuencia de liberación de pulsos de LH. Por lo anterior, se retarda la ovulación posparto y disminuye la actividad del CL, especialmente la producción de P₄²⁶.

Los niveles productivos de los rebaños en esta investigación son 15-18 L/vaca^-1 día^-1, los que generan requerimientos que no se cubren con una dieta a base de pastos ⁴ y en estas condiciones se presenta el BEN ²⁷, que se expresa en la CCP, la que influye sobre el RAO.

Se concluye que el RAO fue temprano, el FD, la ovulación y la actividad luteal ocurren en un periodo de tiempo menor en las vacas con CCP ≥3.5, en las que el CL tiene mayor volumen y son superiores las concentraciones de P₄. La CCP constituyó un factor de riesgo para que las vacas tengan el RAO tardío.