INTRODUCCIÓN

El hormiguero palmero Myrmecophaga tridactyla Linnaeus, 1758, conocido también como oso hormiguero, oso palmero en Colombia, pertenece al superorden Xenarthra, suborden Vermilingua, familia Myrmecophagidae (^{Humanez López & Chacón Pacheco, 2013}). M. tridactyla es un mamífero caracterizado por un cuerpo cubierto de un denso pelaje, la forma de su cola es de penacho, igual o más larga que la longitud cabeza-cuerpo (^{Rojano Bolaño et al. 2014}). Animal de gran tamaño, la amplitud del largo cabeza cuerpo se encuentra entre 100-190 cm de longitud, con un largo de cola entre 64-90 cm (^{De Faria et al. 2015}). Un peso promedio de animales adultos de 40-45 kg; los miembros anteriores son fuertes y musculosos (^{Rojano Bolaño et al. 2014}). La cabeza es elongada, con un desarrollo más grande en la parte facial que la parte craneal. La cavidad craneal es pequeña, formada principalmente por los huesos parietales. La cavidad bucal es relativamente larga, estrecha, ocupada por una lengua larga, delgada, recubierta de saliva; no tiene dientes (^{Farha et al. 2021}).

M. tridactyla es un animal insectívoro especializado, consume hormigas (Hymenoptera: Formicidae) y termitas (Blattodea: Termitidae), en vida silvestre (^{Cunha et al. 2015}); su sistema digestivo es similar a la del perro doméstico (Canis familiaris) y gato doméstico (Felis catus), en términos de digestibilidad de nutrientes (^{Gull et al. 2015}). Se registra la presencia en su dieta de 27 especies de hormigas, agrupadas en 14 géneros, 10 tribus y cinco subfamilias y dos especies de termitas. Los géneros de hormigas que se encuentran con mayor proporción son Camponotus, Solenopsis y Ectatomma (^{Sandoval-Gómez et al. 2012}).

De acuerdo con ^{Miranda et al. (2014)}, su estado de conservación, a nivel internacional y en Colombia, es vulnerable. Se reporta su presencia en Centro América y en Sur América, en el sur del Gran Chaco-Bolivia, Paraguay y Argentina. Se registra como extinto en Belice, Guatemala, Uruguay y en algunas áreas de Costa Rica y Honduras. En Brasil está señalado como regionalmente extinto en los estados de Río de Janeiro, Espíritu Santo y Rio Grande Do Soul y Santa Catarina, mientras que en el estado de Paraná, se encuentra en estado crítico (^{Miranda et al. 2014}; ^{Alberici et al. 2020}). Los estudios de distribución de la especie en Colombia lo reportan en las cinco regiones del país (^{Chacón Pacheco et al. 2017}).

La conservación de la biodiversidad es fundamental para el mantenimiento de los servicios ecosistémicos; sin embargo, las presiones antropogénicas vienen amenazando las poblaciones de vida silvestre. Dentro de la amenaza crítica para M. tridactyla se encuentra la degradación, la fragmentación y la destrucción de su hábitat (^{Diniz & Brito, 2015}; ^{Alberici et al. 2020}), ocasionado por las quemas constantes de praderas, como actividad previa de procesos agrícolas, como parte de la ampliación de la frontera de producción (^{Verdade et al. 2015}; ^{Bertassoni et al. 2019}; ^{Noonan et al. 2021}); la caza furtiva y la persecución de la especie es considerada una amenaza media (^{Humanez López & Chacón-Pacheco, 2013}); el enfrentamiento con caninos (Canis familiaris) y el atropellamiento en vías, causado por la ruptura de los corredores ecológicos (^{Humanez-López et al. 2014}; ^{Diniz & Brito, 2015}; ^{Rojano Bolaño & Ávila Avilán, 2021}). El atropellamiento de animales en las redes viales disminuye la tasa de supervivencia anual de los hormigueros, de 0,95 (0,86-1,00), a niveles de 0,78 (0,62-0.97) (^{Ascensão & Desbiez, 2022}).

La homeostasis, principio fundamental de la fisiología integrativa (^{De Luca Jr., 2022}), es el mecanismo, mediante el cual, se regula la presión arterial, la presión de O₂, la presión de CO₂, el pH de la sangre, los niveles de glucosa, la temperatura corporal y el tamaño de las células en los animales (^{Zatulovskiy & Skotheim, 2020}). En este sentido, la sangre y sus componentes contribuyen al proceso de homeostasis del individuo (^{Alves et al. 2023}). En consecuencia, la determinación de la bioquímica sanguínea permite evaluar el estado de salud de un animal, como, por ejemplo, en los casos de individuos con quemaduras en el cuerpo (^{Souza et al. 2022}).

La salud se puede interpretar como la ausencia de la enfermedad; otros autores, como ^{López-Otín & Kroemer (2021)}, la definen como un compendio de características organizacionales y dinámicas que mantienen la fisiología normal en un individuo. La salud de los animales en la naturaleza debe ser observada como un sistema, compuesto por elementos y sus relaciones, que permiten la supervivencia de las especies, las poblaciones, las comunidades y los ecosistemas. En este sentido, las especies del superorden Xenarthra, incluyendo M. tridactyla, poseen una temperatura corporal y una tasa metabólica basal más baja que otras especies de mamíferos, con similar masa corporal (^{Jean Desbiez & Medri, 2010}).

La valoración médico-veterinaria permite conocer la salud de los animales, para lo cual, se determinan parámetros, como el peso, la temperatura corporal, la frecuencia cardíaca, respiratoria y el tiempo de llenado capilar. Lo anterior, complementado con la hematología, permite establecer la presencia de una infección o inflamación, dado los niveles de neutrófilos y monocitos y el recuento de linfocitos, como indicador de respuesta inmunológica. Niveles de eritrocitos, hemoglobina, hematocrito e índices hematimétricos para evaluar el estado de anemia.

Los estudios en hematología en M. tridactyla incluyen los trabajos realizados en el bioma del cerrado de Brasil y en los zoológicos de Argentina, los cuales, reportan los valores para glóbulos rojos, blancos y plaquetas (^{Alves et al. 2023}, ^{De Oliveira et al. 2017}, ^{Di Nucci et al. 2014}, ^{Sanches et al. 2013}). Igualmente, en Colombia se reportan valores de hematología en animales de vida libre (^{Rojano-Bolaño et al. 2014}). Los trabajos de ^{Satake & Fagliari (2006)} y ^{De Oliveira et al. (2018)} reportan algunos analitos.

Dentro de las prioridades de investigación del súper Orden Xenarthra, propuestas en el II Simposio Colombiano de armadillos, perezosos y hormigueros, se destacó el escaso conocimiento sobre la ecología, reproducción, fisiología y la conservación de estas especies en Colombia (^{Humanez-López et al. 2014}). Teniendo en cuenta estas consideraciones, el presente trabajo tuvo como objetivo conocer aspectos importantes de la homeostasis sanguínea del M. tridactyla, como es la hematología y la bioquímica sérica, descritos escasamente en la literatura científica, fundamentales para establecer los planes de sanidad y la conservación de esta especie.

MATERIALES Y MÉTODOS

Área estudio. El Departamento del Meta se encuentra localizado en el centro - oriente del territorio colombiano, entre los 4º55’ y 1º35’ de latitud Norte y los 74º54’ y 71º3’ de longitud Oeste, formando parte de la región natural de la Orinoquia y parte de la región de la Amazonia colombiana; en general, el departamento del Meta es privilegiado por la biodiversidad. El departamento cuenta con 85.000 km² de extensión, abundante en recurso hídrico y hábitat de una gran cantidad de flora y fauna, propias de la biodiversidad de la Orinoquia Colombiana. El departamento aporta al Sistema Nacional de Áreas Protegidas (SINAP) un total de 20 áreas para la conservación, que cubren aproximadamente 4.460.000 hectáreas, que corresponden al 52 % del territorio, ubicadas en 15 municipios (^{Asamblea Departamental del Meta, 2020}).

Tamaño y toma de muestras de los especímenes. Los especímenes incluidos en el estudio fueron evaluados y rescatados en el periodo 2016 - 2017 en el departamento del Meta, por la autoridad ambiental de la región, la Corporación para el desarrollo sostenible del área manejo especial la Macarena, Cormacarena.

Un total de 21 individuos, ocho hembras y trece machos de los animales rescatados cumplieron los requisitos de inclusión para el estudio: animales vivos, machos o hembras, en aparente buen estado de salud, valorados y liberados nuevamente en su hábitat natural, en la región de estudio (^{Fernández-Manrique et al. 2021}).

Una vez identificado el animal reportado a Cormacarena para rescatar, se procedió a la captura, se empleó nasa red de maya en fibra gruesa de 14 mm, para la restricción física del animal; posteriormente, se transportó a las instalaciones de la Universidad de los Llanos. Se determinó el peso y teniendo en cuenta la curva de crecimiento y de desarrollo, descrita para M. tridactyla (^{Valle Jerez & Halloy, 2003}), se clasificaron como neonatos, los individuos con peso entre 1.200 y 2.000 g; como juveniles, aquellos con peso entre 4.000 y 6.500 g y adultos, los de más de 6.500 g.

Para la toma de la muestra de sangre se calculó el volumen para aplicación del medicamento de sedación, Zoletil® (tiletamina-zolazepam), a una dosis de 4 mg/k de peso vivo. Se aplicó el sedante vía intramuscular, se mantuvo bajo control médico-veterinario. Se extrajo de 5 a 10 mL de sangre, por venopunción en la vena cefálica, vena femoral o vena safena externa. Las muestras de sangre se colectaron en tubo con anticoagulante etilen diamino tetraacetato de calcio (EDTA) al 10 % y un tubo sin anticoagulante. Finalmente, se valoró y monitoreó el individuo hasta su liberación. La toma de muestras se registró en la base de datos del sistema de información sobre biodiversidad de Colombia-SIB (^{Fernández-Manrique et al. 2021}).

Examen clínico y análisis de laboratorio. A cada animal se le practicó examen y registro de datos en historia clínica, teniendo en cuenta la frecuencia cardiaca, respiratoria y la temperatura corporal. Se realizó un examen exploratorio de carácter general y por sistemas, con el propósito de verificar el estado de salud; se tomó la temperatura rectal, se determinó el sexo por observación directa. Se exploró la presencia de síntomas o lesiones compatibles con alguna patología específica.

En el laboratorio se identificó y se registró la muestra. Se determinó el hematocrito mediante el método de micro hematocrito. El hemograma se realizó determinando los parámetros de recuento de glóbulos rojos, blancos y plaquetas de forma manual, en cámara de Neubauer. El recuento diferencial de leucocitos se llevó a cabo en frotis sanguíneo y coloración con Wright, incluyendo neutrófilos, neutrófilos en banda, linfocitos, eosinófilos, monocitos y basófilos. Se determinaron los índices de volumen corpuscular medio (V.C.M), la hemoglobina corpuscular media (H.C.M), la concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM) y el volumen plaquetario medio (VPM). El frotis sanguíneo coloreado con Wright se revisó en microscopio con luz clara, con aumento 100X, observando la presencia de hemoparásitos; se siguieron los protocolos descritos por ^{Diaz González & Ceroni da Silva (2008)}. Los sueros se analizaron con un auto analizador clínico, marca Mindray, en base húmeda, por espectrofotometría y kits comerciales Spinreact, para identificación de las siguientes enzimas, alanina aminotransferasa (ALT), aspartato aminotransferasa (AST), nitrógeno ureico sérico (BUN), fosfatasa alcalina, amilasa, gamma glutamil transferasa (GGT) y creatinina quinasa (CK-Total). Igualmente, mediante técnicas colorimétricas, se analizó creatinina, proteína total, albumina, globulina, bilirrubina total, bilirrubina directa, bilirrubina indirecta, glucosa, colesterol, triglicéridos, calcio y fósforo.

Aspectos éticos. Se tuvo en cuenta los principios éticos para el manejo de los animales establecidos en el Estatuto Nacional de protección para los animales, Ley 84 de 1989 (^{Congreso de la República de Colombia, 1989}), las normas éticas para investigación sin riesgos en comunidades, descritas en la resolución No. 008430 de ^{1993 del Ministerio de Salud} y se obtuvo el aval del Comité de Ética de Investigación de Unillanos, en el acta 04/2016. Igualmente, la Unillanos cuenta con el permiso Marco de recolección de especies silvestres de la diversidad biológica, con fines de investigación científica no comercial, mediante la Resolución 1313 de 2015 de la ANLA.

Análisis de datos. Con los resultados obtenidos de los análisis de laboratorio, se construyó la matriz de datos en Excel? y se realizó un análisis de estadística descriptiva. En el programa Spss statistic 21, se comparó las medias de los valores de hematología y bioquímica sérica entre machos y hembras, con la prueba t de student, con un nivel de significancia del 5% (α=0,05).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

La población muestreada estuvo compuesta por 21 individuos, 61 % machos y 39 % hembras; el 61 % de la población eran adultos, el 24 % neonatos y 15 % juveniles. Una vez revisados los animales no presentaron síntomas, ni signos de enfermedad alguna, por lo que se consideraron en aparente buen estado de salud. Los resultados del hemograma realizado a los individuos de M. tridactyla se observan en la tabla 1 y los resultados de la bioquímica sérica, se presentan en la tabla 2.

En el análisis de los resultados de la prueba t de student no se encontró diferencias significativas, entre las medias de las variables de hematología y la bioquímica sérica, en la población de machos y hembras (Tablas 3 y 4).

Teniendo en cuenta los lineamientos descritos para el seguimiento y el monitoreo post liberación de fauna silvestre rescatada, previo a la liberación, ^{Choperena Palencia & Mancera Rodríguez (2016)} sugieren realizar una valoración integral de los ejemplares, incluyendo exámenes paraclínicos e identificación de agentes patógenos específicos. En este sentido, se presentan los resultados de los análisis de la hematología y la bioquímica, realizados a una muestra de M. tridactyla antes de ser liberados por Cormacarena. Una aproximación inicial para tener en cuenta en el análisis de los resultados, las muestras se tomaron en individuos bajo el efecto de sedación, lo cual, puede alterar los resultados, teniendo en cuenta que son animales silvestres; es preciso realizar la restricción química de los animales para poder tomar las muestras.

Descripción de la población de eritrocitos: los índices eritrocitarios V.C.M, H.C.M, CHCM, RDW definen el tamaño y el contenido de hemoglobina del eritrocito y, además, ayudan a evaluar la función de hematopoyesis de los animales y el diagnóstico diferencial de la anemia. Los resultados obtenidos en este trabajo de 2,98 X10¹² eritrocitos son similares a los reportados por ^{Alves et al. (2023)} y por ^{Di Nucci et al. (2014)}, mientras que ^{Rojano Bolaño et al. (2014)} encontraron un recuento de eritrocitos de 1,97 ? 0,3 X10¹². Los valores de hemoglobina encontrados de 126,5 g/L son similares a los encontrados por ^{Di Nucci et al. (2014)}, ^{Rojano Bolaño et al. (2014)} y ^{Alves et al. (2023)}. En cuanto al hematocrito, el encontrado fue de 38,6 %, valor que es similar a los encontrados por ^{Di Nucci et al. (2014)}, ^{Rojano Bolaño et al. (2014)} y ^{Alves et al. (2023)}; por lo tanto, los valores encontrados para eritrocitos, hemoglobina y hematocrito permiten inferir que los animales liberados por Cormacarena en la región de influencia no presentaban anemia.

Recuento total de leucocitos: los glóbulos blancos forman parte del sistema inmune, genéticamente programado para la neutralización y la eliminación de agentes infecciosos. El recuento promedio de los niveles de leucocitos descrito es similar a los reportados en animales en vida libre en el municipio de Pore-Casanare, región de la Orinoquia Colombiana (^{Rojano Bolaño et al. 2014}), a los reportados en animales en cautiverio del parque zoológico de Sao Paulo-Brasil (^{Sanches et al. 2013}), en Argentina (^{Di Nucci et al. 2014}) y en el Parque zoológico de Brasilia-Brasil (^{De Oliveira et al. 2017}). En cuanto al recuento diferencial de leucocitos, el porcentaje promedio encontrado de 66 % de neutrofilos es similar a los reportado en animales en vida libre en Pore-Casanare, Colombia (^{Rojano Bolaño et al. 2014}).

Recuento de plaquetas: la hemostasia es un sistema fisiológico que impide la salida de sangre, bloquea el daño vascular e inicia los mecanismos de reparación. La hemostasia primaria se da en la interacción vaso sanguíneo-plaquetas, la hemostasia secundaria por las proteínas plasmáticas de la coagulación. En este sentido, el recuento de plaquetas observado es similar a lo encontrado en animales en vida libre en Pore-Casanare, Colombia (^{Rojano Bolaño et al. 2014}).

En general, los recuentos de los promedios celulares encontrados, en los hemogramas son similares a los encontrados en el trabajo realizado en Pore-Casanare, región de la Orinoquia colombiana (^{Rojano Bolaño et al. 2014}). Lo anterior se puede explicar, toda vez que los dos trabajos fueron realizados en animales en vida libre, muestreados con similares métodos de captura, restricción y sedación. Individuos localizados en regiones similares de la Orinoquia colombiana, que comparten paisajes, como el piedemonte llanero y las sabanas inundables. En contraste, se encuentra lo descrito en Brasil, para la población M. tridactyla, expuesta a quemaduras de segundo y tercer grado, donde se observó recuentos celulares con desviación degenerativa, anemia severa, hipoproteinemia y cambios marcados en las enzimas que evalúan el daño muscular (^{Souza et al. 2022}). Otro ejemplo de la importancia del hemograma se observa en el caso descrito por ^{Lértora et al. (2016)}, de anemia y de gastritis hiperplásica en M. tridactyla, ocasionada por la infección de Physaloptera magnipapilla.

Las enzimas son catalizadores biológicos, utilizados en la regulación química de las células y en la homeostasis de los seres vivos. En este sentido, la determinación de las enzimas tiene una importancia diagnóstica, toda vez que su determinación en sangre, más los resultados de la exploración física y la valoración clínica, permite evaluar el estado de salud de un individuo (^{Diaz González & Ceroni da Silva, 2008}). Con este propósito, se discuten los resultados de ALT y AST, que permiten evaluar el funcionamiento del hígado.

Los resultados obtenidos de alanina aminotransferasa (ALT) son similares a los descritos por ^{Satake & Fagliari (2006)}, en animales en vida libre y a los de ^{Satake & Fagliari (2006)} y ^{Di Nucci et al. (2014)}, en animales en cautiverio.

Igualmente, los resultados de aspartato aminotransferasa (AST) son similares a los reportes de ^{Satake & Fagliari (2006)}, en animales de vida libre en el Cerrado Brasilero y a los reportados por ^{Satake & Fagliari (2006)}, ^{Di Nucci et al. (2014)} y ^{De Oliveira et al. (2018)}, para animales en cautiverio.

La amilasa es una enzima que apoya el diagnóstico del estado del páncreas (^{López Villalba & Mesa Sánchez, 2015}). Se encontraron valores promedio de 606,45 ? 207,45U/l, los cuales, fueron similares a los descritos por ^{Satake & Fagliari (2006)}, en animales de vida libre y en cautiverio.

Las proteínas se sintetizan en el hígado, excepto las gammaglobulinas, la alteración en las concentraciones pueden indicar un problema hepático, renal, intestinal, hemorragia o inflamación (^{Diaz González & Ceroni da Silva, 2008}). Los resultados de los promedios encontrados de proteínas totales son similares a los descritos para animales cautivos (^{Di Nucci et al. 2014}; ^{De Oliveira et al. 2018}).

Albumina: comparando los resultados obtenidos, los valores de albumina son similares a los trabajos realizados en animales en vida libre en Brasil (^{Satake & Fagliari, 2006}) y para animales en cautiverio (^{Satake & Fagliari, 2006}; ^{Di Nucci et al. 2014}; ^{De Oliveira et al. 2018}).

Globulina: los valores promedio encontrados en globulina de 3,08 ? 1,22 g/dl son similares a los promedios en animales en cautiverio en el Cerrado-Brasilero (^{De Oliveira et al. 2018}).

Creatinina: las determinaciones en suero de creatinina y albumina ayudan a evaluar la función renal de los animales. Los resultados encontrados son similares en animales en vida libre (^{Satake & Fagliari, 2006}) y a los encontrados en animales en cautiverio en Sao Paulo (^{Satake & Fagliari, 2006}; ^{Di Nucci et al. 2014}) y en el Cerrado Brasilero (^{De Oliveira et al. 2018}).

La valoración de la condición corporal más la determinación de analitos, como la albumina, el calcio y el fósforo, permiten evaluar el estado nutricional de los animales y la dieta suministrada en cautiverio; a continuación, se comparan los resultados de calcio y de fósforo.

Calcio: los niveles de calcio de 2,04 mmol/L son similares a los resultados publicados en animales de vida libre (^{Satake & Fagliari, 2006}) y a los de animales en cautiverio (^{Satake & Fagliari, 2006}; ^{Di Nucci et al. 2014}).

Fósforo: en referencia a este analito, los resultados de 1,52mml/L son similares a lo reportado por ^{Satake & Fagliari (2006)}, para animales en vida libre y en cautiverio. En contraste, los resultados obtenidos son mayores a lo indicado por ^{Di Nucci et al. (2014)}, para animales en cautiverio. Esta última diferencia puede ser explicada, teniendo en cuenta que son animales en cautiverio, a los cuales, se les suministra una dieta elaborada y los animales en vida libre son insectívoros especializados.

Se puede concluir que, teniendo en cuenta la valoración médico-veterinaria, los resultados obtenidos y su respectiva comparación con otros estudios de M. tridactyla, se puede inferir que los animales se encontraban sanos y que los valores reportados en el presente estudio se pueden emplear como referentes para futuros trabajos de investigación y en el desarrollo de planes de conservación de esta especie.